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Calcein AM细胞增殖与毒性检测试剂盒说明书

产品信息
  • 【细胞冻存】
    待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
    中文名称：Calcein AM细胞增殖与毒性检测试剂盒说明书
    英文名称：
    产品规格：500T|1000T
    发货周期：1～3天
    绿色荧光细胞活性检测试剂盒是采用一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，检测细胞增殖情况。当荧光染色试剂其进入到细胞质后，酯酶会将其水解并留在细胞内,发出强绿色荧光，它的细胞毒性很低，不会YZ任何的细胞功能如增殖或淋巴球的趋化性。
    储存条件-20℃避光保存。
    有效期一年。
    【培养指南】
    对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
    1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    【复苏的原则】
    产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
    细胞的种类：
    种：
    是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的Z好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
    第二种：
    是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
    质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，进口来源，保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
    细胞培养操作规程：
    一．培养基及培养冻存条件准备：
    1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
    2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
    3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
    二．细胞处理：
    1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
    2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
    对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
    方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
     环酰代型辅酶I/代辅酶/还原烟酰次黄嘌呤二核苷/代-NAD/Thio-NAD
     3--2-羧酯尿素酶（巨豆）/脲酶/大豆酵素/尿素（酰）水解酶/Urease(jack bean)
     4-(4--1-嗪)苄性酶/性酯酶/CIP/CIAP
     2-嘧啶-4-羧胰蛋白酶YZ剂/SBTI/STI/Trypsin inhibitor(soybean)
     2--5-叔噻吩-3-酯核糖核酶YZ剂/ RNA酶YZ剂/Rnasin Inhibitor
     6--3-哒嗪脱氧核糖核酶Ⅰ（牛胰）/去氧细胞核酶/氧核糖核-5ˊ-寡核苷水解酶/无核糖核酶/脱氧核糖核去聚合酶/脱羟核糖核酶(牛胰)/除氧细胞核酶(牛胰) /DNA酶/Dnase Ⅰ
     6-(三)啶-3-醇去核酶试剂/Nuclease eliminator/Nuclease eliminator Wipes
     (S)-3-叔氧羰啶RNase&DNase清除剂/Rnase&Dnase away
     3--5-核糖核酶T1/Rnase T1
     1-胍盐盐核糖核酶H/Ribonulease H
    Calcein AM细胞增殖与毒性检测试剂盒说明书Acetylenedicarboxylic acid炔二142450
    4PHENOXYBENZENESULFONYL CHLORIDE4酰1623923
    LIPOPHILIC SEPHADEX葡聚糖凝胶9041376
    3(Trifluoromethyl)phenylacetone3三21906398
    1,4Diaminobutane dihydrochloride1,4二333937
    9Anthracenemethanol9蒽1468957
    BROMANIL四溴1,4醌488482
    Eflornithine hydrochloride依鸟68278239
    Trifluoroacetophenone2,2,2三434457
    BOCDLeucine monohydrateBOCD亮16937998
    4Nitroaniline对100016
    3ISOPROPYLANILINE3异5369164
    4(otolyloxy)piperidine4(2)啶63843425
    Benzimidazole并咪唑51172
    NCarbobenzyloxyLaspartic acidN苄羰L天冬1152610
    蓝萼素;Glaucocalyxin A 79498310 订购|咨询  规格 20mg
    两面针;Nitidine Chlo 13063042 订购|咨询  规格 20mg
    异茜草素;Rubiadin、 1,3 117022 订购|咨询  规格 20mg
    10姜;10Gingerol 23513157 订购|咨询  规格 20mg
    旱莲苷A;Ecliptasaponin  订购|咨询  规格 20mg
    黄豆黄苷; Glycitin 40246104 订购|咨询  规格 20mg
    告亭苷元;caudatin 38395027 订购|咨询  规格 20mg
    泛钙;Calcium pantothe 137086 订购|咨询  规格 100mg
    二丹参Ⅰ;Dihydrotanshi 87205990 订购|咨询  规格 20mg
    香;3,5Dimethoxy4 134963 订购|咨询  规格 20mg
    橙花;Nerol 106252 订购|咨询  规格 0.1ml
    柴胡皂苷B2;Saikosaponin 58316419 订购|咨询  规格 20mg
    长春花;Vinblastine 865214 订购|咨询  规格 20mg
    白花前胡素 ;Praeruptorin  订购|咨询  规格 20mg
    白当归素;Byakangelicin 19573014 订购|咨询  规格 20mg
    操作步骤(仅供参考)：
    1、Calcein AM细胞增殖与毒性检测试剂盒说明书贴壁细胞的消化
    ①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
    ②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
    ③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
    化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
    ④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
    ⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
    2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。

     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
    • 信息声明：本产品供应信息由仪器网为您整合，供应商为（上海研生实业有限公司），内容包括 （Calcein AM细胞增殖与毒性检测试剂盒说明书）的品牌、型号、技术参数、详细介绍等；如果您想了解更多关于 （Calcein AM细胞增殖与毒性检测试剂盒说明书）的信息，请直接联系供应商，给供应商留言！
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