产品库
登录
首页 找仪器 社区 百科 新品 供应商 品牌 应用 资料 仪企号 展会 标准 求购 招中标

细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒(Calcein AM，PI法，适用于FACS、FM)说明书

产品信息
  • 实验报告：
    一、细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒(Calcein AM，PI法，适用于FACS、FM)说明书分离与培养：
        1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
        2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
        3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
        4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
        5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
    二、免疫荧光鉴定：
        1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
        2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
        3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
        4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
        5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
        6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
    中文名称：细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒(Calcein AM，PI法，适用于FACS、FM)说明书
    英文名称：Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Cells 说
    产品规格：1000T
    发货周期：1～3天
    本试剂盒为动物细胞死活检测提供了双色荧光染色方法。本试剂盒采用两种广泛常用的荧光探针，通过检测细胞内酯酶活性和质膜完整性两个方面反映细胞活力。本试剂盒适用于荧光显微镜、荧光多孔板、扫描仪、流式细胞仪以及其他荧光检测系统。本试剂盒可以应用于大多数的真核哺乳动物细胞，包括贴壁细胞核某些组织，但不适用与细菌、酵母。该方法更快捷安全且灵敏度更高。
    原理在钙黄素AM存在活细胞内时，其特点就是由于胞内无所不在的酯酶活性作用，由几乎无荧光、具有细胞膜透性的钙黄素AM生成具有强烈荧光信号的绿色荧光物质（Ex/Em495nm/520nm）。而对于受损的细胞膜来说，碘化丙啶(PI)可以传过进入细胞，与核酸结合，荧光信号从而放大40倍，产生一个明亮的红色荧光信号的死细胞（Ex/Em530nm/620nm）。
    注意事项：
          尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
          如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
          染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
          如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
          荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
          用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
          需自备PBS。
          本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
          为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
    以下是公司正在产品：
     二四酸四四水化合物1，3-二基脲/二基脲/N,N-二基脲/1,3-二脲/1,3-Dimethylurea
     N-(三基)-L-天冬酰布鲁诺广谱GX杀菌剂/溴醇/2-溴-2--1,3-二醇/拌棉醇/溴二醇/YJ醇/皮乐宝/布罗波尔/布洛波尔/2-溴-2--1,3-二醇/Bronorol
     对-3-酸体生物防腐剂/Proclin 300
     1-羟基-2-萘酸酯十基三基溴化铵/(1-基)三基溴化铵/基三基溴化铵/Decyltrimethylammonium bromide
     酸肼离子交换剂Ⅴ
     N-异基-4-酰酰离子交换剂Ⅲ
     1-氧基羰酰基-7-萘离子交换剂Ⅰ
     2-二基-6-基啶吐温80/吐混80/聚氧基油酸山梨糖醇/聚环氧脱水山梨糖醇单油酸酯/聚氧烯山梨糖醇酐单油酸酯/乳化剂T80/Tween 80
     3-基-2-啶吐温65/吐混65/聚氧烯山梨糖醇酐三硬脂酸酯/聚氧烯失水山梨醇三硬脂酸酯/聚氧基三硬脂酸清凉茶醇/Tween 65
     2-溴-3-酸吐温60/吐混60/聚氧烯山梨糖醇酐单硬脂酸酯/聚氧基硬脂酸山梨糖醇/聚环氧山梨糖醇单硬脂酸酯/乳化剂T-60/聚氧烯失水山梨醇硬脂酸酯/Tween 60
    细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒(Calcein AM，PI法，适用于FACS、FM)说明书天净沙镍柱原位清洁试剂盒  规格HPLC≥98%;20mgLithospermoside
    天净沙镍柱原位再生试剂盒  规格HPLC≥98%;20mgshikonin
    兔抗GST标签多抗  规格HPLC≥98%;20mgLithospermic acid
    小鼠抗c-Myc标签单抗（100 μL）  规格HPLC≥98%;20mgSyringin
    小鼠抗c-Myc标签单抗（1000 μL）  规格HPLC≥98%;20mgCorynoline
    小鼠抗CBP标签单抗  规格HPLC≥98%;20mgOsmundacetone
    小鼠抗E2标签单抗  规格HPLC≥98%;20mgPaclitaxel
    小鼠抗Flag标签单抗（100 μL）  规格HPLC≥98%;20mgShionone
    小鼠抗Flag标签单抗（1000 μL）  规格HPLC≥98%;20mgAstragalin
    小鼠抗GFP标签单抗 （100 μL）  规格HPLC≥98%;20mgbuddlejasaponin IV
    小鼠抗GFP标签单抗 （1000 μL）  规格HPLC≥98%;20mgL-Stepholidine
    小鼠抗GST标签单抗（100 μL）  规格HPLC≥98%;20mg4-Hydroxycinnamic acid
    小鼠抗GST标签单抗（1000 μL）  规格HPLC≥98%;20mgHordenine
    小鼠抗HA标签单抗（100 μL）  规格HPLC≥98%;20mgα-mangostin
    小鼠抗HA标签单抗（1000 μL）  规格HPLC≥98%;20mgγ- Mangostin
    培养操作步骤：
    1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
    2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
    3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
    4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
    5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
    • 信息声明：本产品供应信息由仪器网为您整合，供应商为（上海研生实业有限公司），内容包括 （细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒(Calcein AM，PI法，适用于FACS、FM)说明书）的品牌、型号、技术参数、详细介绍等；如果您想了解更多关于 （细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒(Calcein AM，PI法，适用于FACS、FM)说明书）的信息，请直接联系供应商，给供应商留言！
    供应商产品推荐
      您可能感兴趣的产品