2019-nCoV冠状病毒ORF1ab-N片段质粒

2019-nCoV冠状病毒ORF1ab-N片段质粒ELISA测定错误的原因分析：ELISA测定出现假阳性和假阴性的结果，主要有标本因素、试剂因素和操作因素，其中标本因素主要由干扰性物质所致，分内源性和外源性两种。仅供科研使用
产品名称: 2019-nCoV冠状病毒ORF1ab-N片段质粒
规格: 2ug
选择方法：
1. 明确检测何种蛋白；
2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性Z好； 
3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒；
4. 咨询我公司使用的抗体类型；
5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。

动物组织匀浆的制备：
1、取组织块（0.1g～0.2g）Z少可到2～5mg在冰冷的盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质（pH7.4， 0.01mol/L Tris-HCl，1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的溶液）或者0.86%的盐水于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式有多种：手工匀浆，机器匀浆，超声粉碎。
① 手工匀浆：左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次（6～8分钟），充分研碎，制成10%的匀浆液。
② 机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时间10秒/次，间隙30秒，连续3～5次，在冰水中进行），皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
③ 超声粉碎：用超声粉碎机进行粉碎，可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎，也可用国产超声波发生仪，用400安培，5秒/次，间隙10秒反复3～5次。
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机2500转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定。
对于测定结果的判定主要分定性和定量两种：
①定性测定：定性测定的结果判断一般分为"阳性"和"阴性"两种。"阳性"表示该标本在该测定系统中有反应，"阴性"则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果，即用滴度来表示反应的强度，其实质仍是一个定性试验。在间接法和夹心法ELISA中，阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反，阴性孔呈色深于阳性孔。
②定量测定：在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。
A.测定大分子量物质的夹心法ELISA，标准曲线的范围一般较宽，曲线点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数值，以检测物的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈S形，其头、尾部曲线趋于平坦，ZY较呈直线的部分是Z理想的检测区域。
B.测定小分子量物质常用竞争法，其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。ELISA测定的标准曲线注意图中横坐标为对数关系，这更有利于测定系统的表达。
ELISA的操作要点:
1）标本的采取和保存：可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本；
2）试剂的准备：所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液；
3）加样：一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。
4）保温：ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育。
5）洗涤：洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。
6）显色和比色：显色是ELISA中的一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。
7）结果判断：分定性判定和定量判定。
要点：
☆标本的采取和保存：可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定（如血清、尿液），有些则需经预处理（如粪便和某些分泌物）。大部分ELISA检测均以血清为标本；
试剂的准备：所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液；
加样：一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。
保温：ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育。
洗涤：洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。
显色和比色：显色是ELISA中的一步温育反应，此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体，然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。
结果判断：分定性判定和定量判定。
大鼠白介素23(IL-23)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-23 ELISA Kit
Mouse leukocyte differeiation aigen 30 (CD30) ELISA Kit 小鼠白细胞分化抗原30(CD30)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠IgM(mouse IgM) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforIL-8/CXCL8(Mouseierleukin8)ELISAKit小鼠白介素8规格：48T/96T
通用型海鸟弯曲杆菌(Campylobacterlaridis)试剂盒20次
ELISAKitAch大鼠乙酰胆碱规格：48T/96T
大鼠白介素21(IL-21)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-21 ELISA Kit
Mouse leukemia inhibitory factor receptor (LIFR) ELISA Kit 小鼠白血病YZ因子受体(LIFR)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠白介素-1RA(mouse IL-1ra) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforIL-7(RatIerleukin-7)ELISAkit大鼠白介素7规格：48T/96T
通用型灰斑病灰梨孢菌(GreyLeafSpotPyriculariagrisea)试剂盒20次
ELISAKitGlp-1大鼠胰高血糖素样肽1规格：48T/96T
大鼠白介素22(IL-22)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-22 ELISA Kit
Mouse leukemia inhibitory factor (LIF) ELISA Kit 小鼠白血病YZ因子(LIF)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠白介素-1b(mouse IL-1b) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforIL-8/CXCL8ELISAKit大鼠白介素8规格：48T/96T
通用型黄瓜花叶病毒(CucumberMosaicVirus;CMV)试剂盒20次
ELISAKitADH大鼠乙醇脱氢酶规格：48T/96T
大鼠B因子(BF)ELISA试剂盒 ，英文名： BF ELISA Kit
Mouse Leptospira IgG (Lebtospira) ELISA Kit 小鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA试剂盒
MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit 小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumananspoerassociatedwithaigenprocessing,TAPELISAKit人抗原提呈相关转运蛋白/T细胞活化蛋白规格：48T/96T
通用型悬钩子丛矮病毒(RaspberryBushyDwarfVirus;RBDV)试剂盒20次
ELISAKitT3大鼠三甲状腺原氨酸规格：48T/96T
大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)ELISA试剂盒 ，英文名： IDH1 ELISA Kit
Mouse leptin receptor (LR/Ob-R) ELISA Kit 小鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒
MouseSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 小鼠可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumandesmin,DesELISAKit人结蛋白规格：48T/96T
细胞Akt1/PKBa激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20/50/100
ELISAKitNF-κBp65大鼠核因子-κB亚基p65亲和肽规格：48T/96T
大鼠无翅型MMTV整合位点家族成员3(W3)ELISA试剂盒 ，英文名： W3 ELISA Kit
Mouse leptin (LEP) ELISA Kit 小鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒
MousecomplemefactorH,CFHELISAKit 小鼠补体因子H(CFH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHSPgp96ELISAKit大鼠热休克蛋白糖蛋白96规格：48T/96T
2019-nCoV冠状病毒ORF1ab-N片段质粒细胞NADH心肌黄酶活性染色试剂盒100次
ELISAKitIL-1大鼠白介素1规格：48T/96T
GMCSF/CSF2)ELISA试剂盒