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GSK-3α/βYZ剂（CHIR-99021 trihydrochloride）图片

产品信息

  • 使用方法:
    1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)Z好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
    2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
    3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
    4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
    5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。Z好在1h内检测。
    细胞生物学研究有以下几个方面。
    细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
    ①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
    ②生物膜与细胞器的研究。
    ③细胞骨架体系的研究。
    ④细胞增殖及其调控。
    ⑤细胞分化及其调控。
    ⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
    ⑦细胞的起源与进化。
    ⑧细胞工程。
    产品名称：GSK-3α/βYZ剂（CHIR-99021 trihydrochloride）图片
    英文名称：CHIR-99021 trihydrochloride
    产品规格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
    发货周期：1～3天
    CHIR-99021(CT99021)是一个GSK-3α/β的YZ剂。
    注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他用途！
    CAS号：1782235-14-6
    别名：CT99021 trihydrochloride
    纯度：99.02%
    分子量：574.72
    储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
    细胞培养的优点：
    1.研究的对象是活细胞
    在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
    2.研究条件可以人为控制
    pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
    3.研究的样本可以达到比较均一性
    通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
    4.研究内容便于观察、检测和记录
    采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
    SodiumChlorideVioletpurpleEnrichmentBroth
    BSSAagarmedium
    LES Endo 琼脂 m-Endo Agar，LES 250g 用于滤膜细菌计数(Merck方法)
    乳糖胆盐发酵培养基250g/瓶用于大肠菌群测定incubationmedia乳糖胆盐发酵培养基250g/瓶用于大肠菌群测定
    2×YT肉汤 250 用于基因工程菌大肠杆菌培养
    亚利桑那菌琼脂(SA)于亚利桑那沙门氏菌的选择性分离(SN标准)
    ZymomonasMobilisTMedium
    沙氏琼脂培养基 Sabouraud’s Agar 250 用于真菌检测(GB标准)
    NB培养基250g/瓶用于植物组织培养incubationmediaNB培养基250g/瓶用于植物组织培养
    含225mlLB1肉汤均质袋 10个/包 用于李斯特氏菌制样和前增菌培养(GB 标准)
    双歧杆菌琼脂培养基(BBL琼脂培养基)27330250g用于双歧杆菌的平板计数
    Rogosa 琼脂 (CM0627) Oxoid incubation media Rogosa 琼脂 (CM0627) Oxoid
    头状丝孢酵母 模式菌株，产核霉素。 支/瓶
    大肠菌群快检纸片(水质)5份/包用于水质检验
    碱性胆盐琼脂 250g 用于分离霍乱弧菌
    人腺病毒抗原(ADV-Ag)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
    猪可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)免疫试剂盒 Porcine soluble Vascular cell adhesion molecules 1,sVCAM-1 ELISA Kit
    Humaumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKIT 人坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
    humanmixedlineagekinasedomain-like,MLKLELIS
    GSK-3α/βYZ剂（CHIR-99021 trihydrochloride）图片犬心肌特异性肌钙蛋白T(C)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
    山羊骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)免疫试剂盒 Goat Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit
    内肽2(EM-2)ELISA试剂盒 ，英文名： EM-2 ELISA Kit
    Rat17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA试剂盒大鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒规格：96T/48T
    HumanC-typenaiuret
    培养操作：
    1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
    2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      
    1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
    2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
    3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
    3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
    1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
    2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
    3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
    注意事项：
    GSK-3α/βYZ剂（CHIR-99021 trihydrochloride）图片尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
          如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
          染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
          如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
          荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
          用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
          需自备PBS。
          本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
          为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
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