G12C mutant K-Ras蛋白YZ剂（K-Ras G12C-IN-2）说明

品牌：邦景
型号：BJ-11908
产地：进口、国产
供应商：上海邦景实业有限公司
供应商报价：¥800 - 2800
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产品信息

货号： BJ-11908
保存条件：低温冷藏
供应商：上海邦景
保质期：详见说明书
CAS号：详见说明书
英文名：详见说明书
数量： 54
规格： 1mg

使用方法:
1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)Z好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。Z好在1h内检测。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称：G12C mutant K-Ras蛋白YZ剂（K-Ras G12C-IN-2）说明
英文名称：K-Ras G12C-IN-2
产品规格：1mg
发货周期：1～3天
K-Ras G12C-IN-2是一种新型不可逆的G12C mutant K-Ras蛋白YZ剂。
注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他用途！
CAS号：1629267-75-9
分子量：418.92
储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
波尔顿选择性增菌肉汤添加剂2ml*5每支添加于225mlHB0273中
TTC营养琼脂 TTC Nutrient Agar 用于细菌总数测定
乳糖胆盐培养基 Lactose Bile Medium 250 用于化妆品中粪大肠菌群的测定(GB标准)
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ListeriaEnrichmentBroth
马铃薯葡萄糖半固体琼脂250g用于椰毒假单胞酵米面亚种的产毒培养
RVS肉汤 250(g) incubation media RVS肉汤 250(g)
3% NaC1乳糖发酵管 3% NaC1乳糖发酵管 20支 BR
绿脓菌素测定培养基(PDP)250用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验(GB标准)incubationmedia绿脓菌素测定培养基(PDP)250用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验(GB标准)
PrestonBrothBase
产品名称货号规格用途订购
YPD Broth-capsule 培养基 5capsules incubation media YPD Broth-capsule 培养基 5capsules
粘红酵母模式菌株，产生纳朗果霉素支/瓶
阪崎肠杆菌分离琼脂(ESIATM)250g用于阪崎肠杆菌分离培养
铁琼脂 250g 用于军团菌的选择性分离培养(ISO标准)
人组织蛋白酶D(cath-D)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒组装/原装
Rat lipoprotein associated phospholipase A2 (Lp-PL-A2) ELISA Kit 大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒
HumanAspaateaminoansferase,GOT/GPTELISAKit 人天门冬氨酸转氨酶/谷草转氨酶(GOT/GPT)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
humanhemochromatosistype2/uveni
G12C mutant K-Ras蛋白YZ剂（K-Ras G12C-IN-2）说明人αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒组装/原装
兔子白介素13(IL-13)免疫试剂盒 Rabbit ierleukin 13,IL-13 ELISA Kit
热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒，英文名： HSP-90 ELISA Kit
PorcinevonWillebrandFactor,vWFELISA试剂盒猪血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Humanai-cardiolipinaibodyIgM,AC
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆脱落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
注意事项：
G12C mutant K-Ras蛋白YZ剂（K-Ras G12C-IN-2）说明尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

温馨提示：不可用于临床ZL。

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