人甲状腺癌细胞KMH-2（干细胞库保藏）说明书

【培养指南】
人甲状腺癌细胞KMH-2（干细胞库保藏）说明书对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中
资源名称 人甲状腺癌细胞KMH-2（干细胞库保藏）说明书
种属：KMH-2
类型：甲状腺
形态：梭形细胞，巨细胞
培养方法
培养基：人甲状腺癌细胞KMH-2完全培养基：配方（100 ml）： DMEM (Invitrogen,12430) 90 ml FBS (Gibco) 10 ml 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。

培养细胞冻存方案：
以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。 
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低  1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。 
冻存培养基：
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
尿嘧啶标准品  规格:15mg  英文名称：
万乃韦相关物质C标准品  规格:10mg  英文名称：
万乃韦相关物质D标准品  规格:15mg  英文名称：
D缬更昔韦标准品  规格:10mg  英文名称：
柔比星分离度用混合物标准品  规格:25mg  英文名称：Valrubicin Resolution Mixture
缬沙坦相关物质B标准品  规格:10mg  英文名称：
万古霉素B标准品(含单二万古霉素)  规格:350mg  英文名称：
鸭嘴花  规格:ea  英文名称：
维库铵相关物质A标准品  规格:25mg  英文名称：
维库铵相关物质F标准品  规格:15mg  英文名称：
司班20  特价促销  英文名称:Span20  含量:BS
司班40  特价促销  英文名称:Span40  含量:BR
司班60  特价促销  英文名称:Span60  含量:BS，85%
司班80  特价促销  英文名称:Span80  含量:AR，85%
司班85  特价促销  英文名称:Span85  含量:AR，87%
丝氨脂  特价促销  英文名称:phosphatidylserine  含量:BR，20%
四基硼  特价促销  英文名称:NaTBP  含量:CP，95%
四硼  特价促销  英文名称:Potassiumtetraphenylborate  含量:AR，98%
四铵  特价促销  英文名称:Tetrapropylammoniumbromide  含量:BR，98%
四醋铅  特价促销  英文名称:Lead(IV)acetate  含量:CP，98.5%
人甲状腺癌细胞KMH-2（干细胞库保藏）说明书产品规格：500ml
发货周期：1～3天
用途：
新鲜组织取材后，沉淀以去除多余水分，避免冷冻后产生冰晶
注意事项：
主要由蔗糖、PBS、防腐剂组成。
储存条件：4℃，6个月