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细胞壁不溶性酸性转化酶(B-AI)测试盒(微量法)规格

产品信息
  • 中文名称：细胞壁不溶性酸性转化酶(B-AI)测试盒(微量法)规格
    英文名称：详见说明书
    产品规格：100管/48样
    发货周期：1～3天
    发货周期：1～3天
    测定意义:
    蔗糖转化酶(Invertase，Ivr)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。根据Z适 pH，Ivr分为酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)两种类型。
    AI的Z适pH为3～5。AI分为可溶性AI(S-AI)和细胞壁不溶性AI(B-AI)两种类型。B-AI存在于细胞间隙并结合在细胞壁上，主要参与韧皮部质外体卸载时蔗糖的分解，以维持库源之间蔗糖的浓度。
    测定原理：
    B-AI催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范围内510nm光吸收增加速率与B-AI活性成正比。

    自备用品:
    可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移器、微量石英比色皿/96孔板
    实验报告：
    一、分离与培养：
        1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
        2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
        3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
        4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
        5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
    二、免疫荧光鉴定：
        1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
        2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
        3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
        4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
        5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
        6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
    培养操作步骤：
    1．细胞壁不溶性酸性转化酶(B-AI)测试盒(微量法)规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
    2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
    3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
    4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
    5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
    以下是公司正在产品：
    Mycobacterium kansasii堪萨斯分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒HPLC≥98%缓冲5mgC3c-Ab
    Mycobacterium leprae麻风分枝杆菌PCR试剂盒HPLC≥98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.2<含复溶>5mgADAMTS13-Ab
    Mycobacterium leprae麻风分枝杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒TLC≥98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.2-1.4<含复溶>5mgCFI薯蓣皂苷元BEND3BEND3蛋白抗体96T/48T原装、分装
    Mycobacterium leprae麻风分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒薯蓣皂苷BEND4/CCDC4BEND4蛋白抗体96T/48T原装、分装
    Mycobacterium malmoenes尔摩分枝杆菌PCR试剂盒原薯蓣皂甙BEND6BEND6蛋白抗体96T/48T原装、分装
    n-Octanoicacid规格：StandardforGC,≥99.5%(GC)n-Octanoicacid规格：分析标准品,≥99.9%(GC)蛇床子素c-ABL1/2(Tyr393/429)化非受体酪激酶c-Abl抗体96T/48T原装、分装
    n-Octanamide规格：>98.0%(GC)(N)麝香NF-κBp105/p50(Phospho-Ser373)化细胞核因子p50/k因结合核因子抗体96T/48T原装、分装
    Nobiletin规格：HPLC≥98%,BR山phospho-C-Myc(Thr373)化致癌因C-Myc抗体96T/48T原装、分装
    Nobiletin规格：HPLC≥98%，标准品水杨苷Lin28RNA结合蛋白LIN28抗体96T/48T原装、分装SCP3TPTE神经甘肽样肽GALP抗体
    n-Nonyl-beta-D-maltopyranoside规格：>98%,BCS100A10TACC1甘肽受体2抗体
    细胞壁不溶性酸性转化酶(B-AI)测试盒(微量法)规格ornithine transcarbamylase三(1-萘基)膦
    Arginase 1三（4-基）膦
    methylmalonic acid三（4-三基）膦
    Fc receptor-like protein 3三（3-氧基基）膦
    MCT三(2,4-二基基)...
    n-acetylmuramyl-l-alanine amidase三（4 -氧基- 3 ,...
    Retroviral-like aspartic protease 1三（2,4,6 -三氧...
    CAGE二基膦
    GBU4-5氯二异基膦
    GAGE7(R)-(+)-2,2'-联[二...
    注意事项：
          尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
          如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
          染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
          如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
          荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
          用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
          需自备PBS。
          本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
          为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
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