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3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒(微量法)规格

产品信息
  • 实验报告：
    一、3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒(微量法)规格分离与培养：
        1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
        2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
        3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
        4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
        5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
    二、免疫荧光鉴定：
        1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
        2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
        3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
        4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
        5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
        6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
    中文名称：3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒(微量法)规格
    英文名称：详见说明书
    产品规格：100管/96样
    发货周期：1～3天
    发货周期：1～3天
    测定意义:
    3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的关键酶，广泛存在于动植物和微生物体内，催化1，3-二磷酸甘油酸转变为3-磷酸甘油酸，产生1分子ATP，具有影响DNA复制和修补及刺激病毒RNA合成等生物学功能，广泛应用于药物靶标设计。
    测定原理：
    3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP产生1,3-二磷酸甘油酸和ADP，1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油脱氢酶和NADH作用下产生3-磷酸甘油、NAD和磷酸，340nm处的吸光度变化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。
    自备实验用品及仪器：

    天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿。
    注意事项：
          尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
          如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
          染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
          如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
          荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
          用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
          需自备PBS。
          本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
          为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
    以下是公司正在产品：
    Lactococcus lactis 乳酸乳球菌PCR试剂盒葡萄糖HEATR7B2热休克蛋白受体家族蛋白7B2抗体96T/48T原装、分装Salusin alphaUTS2D囊性组织体蛋白15抗体
    Lactococcus lactis 乳酸乳球菌染料法荧光定量PCR试剂盒S100BUlex Europaeus Lectin 1酸化接头蛋白Gab2抗体
    Lactococcus lactis 乳酸乳球菌探针法荧光定量PCR试剂盒SOX11UBAP1通用转录因子2H肽1抗体
    Lactococcus spp. 乳酸杆菌属通用PCR试剂盒SERBP1Ubiquitously expressed transcript甘油激酶抗体
    Lactococcus spp. 乳酸杆菌属通用染料法荧光定量PCR试剂盒SFR19Ubiquitin D线粒体甘油三酸脱酶2抗体
    o-Methoxycinnamaldehyde规格：>98%，BRsVEGFR2Uteroglobin谷氨酰胺合成酶/谷氨酸氨连接酶抗体
    Omeprazole-d3规格：美国进口SAHHUROD甘油三酸脱酶1抗体
    OmeprazoleSulfoneN-Oxide规格：美国进口phospho-Smad2 (Ser465)phospho-SLAMF1 (Tyr281)神经节苷酯抗体
    OmeprazoleSulfone规格：美国进口phospho-BAD(pSer128)英文名称ZNF749促代谢型谷氨酸受体2+4抗体
    OmeprazoleSulfide规格：美国进口OmeprazoleSodiumMonohydrate规格：含量测定Bak(BCL2 homologous antagonist/killer)英文名称phospho-ZAP70 (Tyr292)GPNMB抗体
    3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒(微量法)规格dentin phosphoprotein2,4-二基肼盐酸盐
    ELISA Kit for ChemokineLigand 32,5-二肼盐酸盐
    Malate Dehydrogenase22,5-二氯肼盐酸盐
    herpes virus-13,5-二氯肼盐酸盐
    rotavirus antibody2,6-二氯肼盐酸盐
    α-GlycosidaseD-半乳糖胺盐酸盐
    CC-chemokine receptor 31-(1-金刚烷基)基...
    Malate Dehydrogenase赤
    ubiquitin五二
    dihydrobiopterin五氯化
    培养操作步骤：
    1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
    2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
    3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
    4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
    5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
    • 信息声明：本产品供应信息由仪器网为您整合，供应商为（上海研生实业有限公司），内容包括 （3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒(微量法)规格）的品牌、型号、技术参数、详细介绍等；如果您想了解更多关于 （3-磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒(微量法)规格）的信息，请直接联系供应商，给供应商留言！
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