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人膀胱移行细胞癌细胞(2013年新引进)(干细胞库保藏)价格

产品信息
  • 产品名称 人膀胱移行细胞癌细胞(2013年新引进)(干细胞库保藏)价格
    种属 T24
    价格 来电可享受优惠

    资源名称 人膀胱移行细胞癌细胞(2013年新引进)(干细胞库保藏)
    种属:T24

    类型:膀胱
    形态:上皮样
    培养方法
    培养基:1. 人膀胱移行细胞癌细胞完全培养液配方(100 ml): McCoy's 5a Medium (Invitrogen, 12330-031) 90 ml FBS (Biochrom, S0115) 10 ml
    生长特性:贴壁生长
    收到细胞后,在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况:
    (一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
    (二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。
    人膀胱移行细胞癌细胞(2013年新引进)(干细胞库保藏)价格具体步骤如下:
    1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
    2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。
    注意事项:
    1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。 
    2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。 
    3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。 
    4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。 
    5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。


    实验材料: 
    1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
    2. 100ml灭菌烧杯2个; 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞
    3、50ml离心筒2个 
    4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个 
    5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个 
    6、细胞计数板1块; 
    7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把; 
    8、酒精灯1台; 
    琥珀酰单胆标准品  规格:150mg  英文名称:Succinylmonocholine Chloride

    染料木苷标准品  规格:30mg  英文名称:Genistin
    标准品  规格:200mg  英文名称:Haloperidol
    花青素标准品  规格:25mg  英文名称:Cyanidin Chloride
    红霉素B标准品  规格:100mg  英文名称:Erythromycin B
    利孕标准品  规格:20mg  英文名称:Lynestrenol
    噻相关物质A标准品  规格:10mg  英文名称:
    醋戈那瑞林标准品  规格:50mg  英文名称:Gonadorelin Acetate
    标准品  规格:200mg  英文名称:Trichlorfon
    青霉标准品  规格:200mg  英文名称:Penicillamine
    T4DNA连接酶  特价促销  英文名称:T4DNALigase  含量:层析纯,30u/mg
    T4RNA连接酶  特价促销  英文名称:T4RNALigase  含量:BR
    T7DNA聚合酶  特价促销  英文名称:T7DNAPolymerase  含量:BR,破壁率90%
    T7RNA聚合酶  特价促销  英文名称:T7RNAPolymerase  含量:BR,2万u/g
    TaqDNA聚合酶  特价促销  英文名称:TaqDNAPolymerase  含量:BR,400u/mg,粉末
    TaqplusDNA聚合酶  特价促销  英文名称:TaqplusDNAPolymerase  含量:BR,500800u/mg,酵母,液体
    TMB底物溶液  特价促销  英文名称:3,3,5,5Tetramethylbenzidinesolutionliquidmembranesubstrate  含量:BR,98%
    TMB盐盐  特价促销  英文名称:TMB•2HC1  含量:BR,90%
    TMB游离  特价促销  英文名称:TMB  含量:BR,98%
    TMB游离溶液  特价促销  英文名称:3,3,5,5Tetramethylbenzidinesolutionliquid1component  含量:BR,98%
    人膀胱移行细胞癌细胞(2013年新引进)(干细胞库保藏)价格Hoechst33258 Staining Solution产品规格:10ml|50ml

    发货周期:1~3天
    用途:
    细胞凋亡检测、普通细胞核染色、常规的DNA染色。
    注意事项:
    Hoechst33258是一种荧光染料,可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。染色染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。
    储存条件:-20℃,避光,6个月
    实验报告:
    一、分离与培养:
        1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
        2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
        3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
        4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
        5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
    二、免疫荧光鉴定:
        1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
        2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
        4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
        5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
        6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。


     
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