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γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测试盒(可见分光光度法)价格

产品信息
  • 中文名称：γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测试盒(可见分光光度法)价格
    英文名称：详见说明书
    产品规格：50管/48样
    发货周期：1～3天
    发货周期：1～3天
    测定意义:
    GCL 是 GSH 合成的限速酶，GSH 对 GCL 有反馈YZ作用。GCL基因表达受多种因素调节，如氧化剂、抗氧化剂、生长因子和炎症因子等。GCL活性高低对GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影响。
    测定原理：
    在ATP和Mg2+存在下，GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸；同时ATP去磷酸化产生无机磷分子，通过测定无机磷毫摩尔数，即可计算出GCL活性。
    实验中所需仪器及设备：

    可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、移液器、1ml比色皿、双蒸水。
    实验报告：
    一、分离与培养：
        1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
        2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
        3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
        4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
        5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
    二、免疫荧光鉴定：
        1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
        2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
        3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
        4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
        5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
        6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
    培养操作步骤：
    1．γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测试盒(可见分光光度法)价格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
    2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
    3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
    4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
    5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
    以下是公司正在产品：
    Fusarium sporotricoides拟枝孢镰刀菌染料法荧光定量PCR试剂盒48T/96TELISAKitforEctonucleotidePyrophosphatase/Phosphodiesterase6(ENPP6)卫矛醇半固体发酵管
    Fusarium sporotricoides拟枝孢镰刀菌探针法荧光定量PCR试剂盒48T/96TELISAKitforLipaseK(LIPK)V-P半固体琼脂发酵管Nanog fragmentSMAD9转录调节因子HOXD9抗体
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    PhosphoricAcid-D3(D,99%)规格：D,99%Nephrin ProteinS100B己糖苷酶D抗体
    Phosphoramidondisodiumsalt规格：0.99NeurocanSOX11HHLA2蛋白抗体
    Phosphomolybdicacidhydrate规格：BCNF2/merlin(neurofibromatosis type 2)SERBP1羟脯氨酸抗体
    PhospholipaseA2fromCrotalusadamanteusVenom规格：比活性：>200U/mg，BCSLN英文名称TORC2脑肠肽抗体
    γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)测试盒(可见分光光度法)价格Echinococcus granulosus IGM蒽醌
    Echinococcus granulosus IgG2-氯蒽醌
    Neopterin antibody醌醌
    myelin oligodendrocyte glycoprotein antibody1,4-二羟基蒽醌
    Chlamydiapneumoniae IgM1,8-二羟基蒽醌
    Chlamydiapneumoniae IgG苊醌
    Bruton'S Tyrosine Kinase2-氯蒽醌
    rheumatoid factor IgG2-氯-1,4-醌
    rheumatoid factor IgA四氯醌
    rheumatoid factor IgM2-基蒽醌
    注意事项：
          尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
          如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
          染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
          如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
          荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
          用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
          需自备PBS。
          本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
          为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
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