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NADH氧化酶(NOX)测试盒(微量法)规格

产品信息
  • 培养操作步骤：
    1．NADH氧化酶(NOX)测试盒(微量法)规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
    2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
    3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
    4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
    5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
    中文名称：NADH氧化酶(NOX)测试盒(微量法)规格
    英文名称：详见说明书
    产品规格：100管/96样
    发货周期：1～3天
    发货周期：1～3天
    测定意义:
    NOX(EC 1.6.99.3)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可在氧气存在下，直接将NADH氧化为NAD。该酶不仅参与NAD的再生，而且与免疫反应密切相关。
    测定原理：
    NOX能够将NADH氧化为NAD，NADH的氧化与2,6靛蓝(DCPIP)的还原相偶联，蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP，在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。
    需自备的仪器和用品：

    可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水
    实验报告：
    一、分离与培养：
        1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
        2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
        3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
        4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
        5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
    二、免疫荧光鉴定：
        1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
        2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
        3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
        4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
        5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
        6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
    注意事项：
          尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
          如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
          染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
          如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
          荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
          用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
          需自备PBS。
          本产品于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或ZL，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
          为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
    以下是公司正在产品：
    Enterovirus type 71（EV71）肠道病毒71型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒48T/96TELISAKitforMembralin(MBRL)李氏增肉汤(LB1，LB2)础KIAA1576SMCPFLAG Tag标签抗体（N端）
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    Enterovirus(EV)肠道病毒A组探针法荧光定量RT-PCR试剂盒VGFSPANXB1衰老关键蛋白抗体
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    Potassiumiodide规格：含量测定VTGSHROOM1凋亡调节基因之一抗体（短型）
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    HBV preS1Ag2,4,6-三溴酚

     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
    • 信息声明：本产品供应信息由仪器网为您整合，供应商为（上海研生实业有限公司），内容包括 （NADH氧化酶(NOX)测试盒(微量法)规格）的品牌、型号、技术参数、详细介绍等；如果您想了解更多关于 （NADH氧化酶(NOX)测试盒(微量法)规格）的信息，请直接联系供应商，给供应商留言！
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