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线粒体呼吸链复合物II试剂盒(琥珀酸-辅酶Q还原酶)规格

产品信息
  • 【细胞冻存】
    待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
    中文名称：线粒体呼吸链复合物II试剂盒(琥珀酸-辅酶Q还原酶)规格
    英文名称：Electron transport chain Complex II assay kit
    产品规格：20管/10样
    发货周期：1～3天
    发货周期：1～3天
    检测指标：线粒体呼吸链复合物II
    线粒体呼吸链复合物II（琥珀酸－辅酶Q还原酶）活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成辅酶Q同功类似物二氯酚靛酚，通过反应系统测定样品中二氯酚靛酚还原后吸光峰值的变化，即采用比色法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于其适合于各种纯化线粒体样品（动物、人体、酵母）以及细胞或组织裂解悬液样品的琥珀酸－辅酶Q还原酶的特异性活性检测。可用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。
    线粒体呼吸链复合物II，通常称为琥珀酸－辅酶Q还原酶或琥珀酸脱氢酶（Succinate-Coenzyme Q Reductase；Succinate Dehydrogenase），是线粒体电子传递链与三羧酸循环链接的载体：含有四个亚单位，包括共价结合的辅基黄素腺嘌呤二核苷酸（flavin adenine dinucleotide；FAD）和三个铁硫ZX（Fe-S clusters），以及细胞色素b亚单位，其Z特征性的酶活性是丙二酸钠敏感的琥珀酸－辅酶Q还原酶。复合物II催化琥珀酸（succinate）被氧化为富马酸（fumarate），线粒体内电子由供体FAD传递到内膜上辅酶Q受体（泛醌；ubiquinone）的能量转移反应，进行呼吸链传递。该酶异常会导致嗜铬细胞瘤（paraganglioma）、肾上腺嗜铬细胞瘤（pheochromocytoma）和Leigh综合征。基于琥珀酸底物，通过琥珀酸－辅酶Q还原酶的催化，氧化为富马酸，同时氧化型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIP）转化为还原型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIPH2），在分光光度仪下产生吸光峰值的变化（600nm 波长），由此定量测定琥珀酸－辅酶Q还原酶的特异活性。
    试剂盒组份：
    缓冲液（Reagent A） 20 毫升

    反应液（Reagent B） 2.5 毫升
    阴性液（Reagent C） 2 毫升
    底物液（Reagent D） 500 微升
    【培养指南】
    对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
    1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    【复苏的原则】
    产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
    细胞的种类：
    种：
    是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的Z好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
    第二种：
    是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
    质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，进口来源，保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
    细胞培养操作规程：
    一．培养基及培养冻存条件准备：
    1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
    2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
    3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
    二．细胞处理：
    1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
    2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
    对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
    方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    Astrovirus(AV)星状病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒ACBD4SalI1500 units猪单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)免疫试剂盒
    Astrovirus(AV)星状病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒ABHD4SalI5x1500 units猪单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫试剂盒
    Aujeszky's Disease Virus(ADV)奥叶兹基氏病病毒PCR试剂盒ADCK2SalI2000 units猪催乳素(PRL)免疫试剂盒
    Aujeszky's Disease Virus(ADV)奥叶兹基氏病病毒染料法荧光定量PCR试剂盒ALDH16A1SduI (Bsp1286I)500 units猪催产素(OT)免疫试剂盒
    Aujeszky's Disease Virus(ADV)奥叶兹基氏病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒AMIGO3SmaI1200 units猪促性腺激素YZ激素(GnIH)免疫试剂盒
    Salidroside规格：≥98%,BRTuberin英文名称Phospho-Rb (Thr821)醇胺激酶β抗体
    Salicylicacid规格：>99.5%,ARPhospho-Tuberin (Ser1387)英文名称Raptor微管相关末端结合蛋白2抗体
    Salicylicacid规格：含量测定Phospho-Tuberin(Ser939)英文名称Phospho-Raptor (Ser792)减数分裂内切酶EME1抗体
    Salicylamide规格：HPLC法含量测定Phospho-Tuberin(Tyr1571)英文名称phospho-c-Raf (Ser289)延伸突触蛋白2抗体
    Salicylalcohol规格：>98%,BRSalcitoninAcetate(SalmonCalcitonin)规格：>95%,BRPhospho-TSC2 (Thr1462)英文名称RICTOR延伸突触蛋白1抗体
    线粒体呼吸链复合物II试剂盒(琥珀酸-辅酶Q还原酶)规格Ribonucleotide Reductase M1土荆皮酸
    copeptin5-羟基马鞭草苷
    IQ motif containing GTPase activating protein 1人参二醇
    fibronectin typeⅢ domain-containing protein 5黄柏
    reduced glutathione鞣花酸
    lipid peroxlde京尼平苷酸
    PGC-1α甜菜
    peroxisome proliferators activator receptors Gamma胞嘧
    peroxiredoxin 2常山素
    Catalase朝藿定B
    操作步骤(仅供参考)：
    1、线粒体呼吸链复合物II试剂盒(琥珀酸-辅酶Q还原酶)规格贴壁细胞的消化
    ①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
    ②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
    ③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
    化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
    ④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
    ⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
    2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。

     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
    • 信息声明：本产品供应信息由仪器网为您整合，供应商为（上海研生实业有限公司），内容包括 （线粒体呼吸链复合物II试剂盒(琥珀酸-辅酶Q还原酶)规格）的品牌、型号、技术参数、详细介绍等；如果您想了解更多关于 （线粒体呼吸链复合物II试剂盒(琥珀酸-辅酶Q还原酶)规格）的信息，请直接联系供应商，给供应商留言！
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