小鼠抗内皮细胞抗体(AECA)小鼠ELISA检测试剂盒

操作步骤1. 标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；。2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。4. 温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。5. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。6. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。7. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 8. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。9. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。