决明子染料法PCR鉴定试剂盒说明书_详细资料

产品信息

货号： BHP20333
保存条件：低温冷藏
供应商：上海博湖
保质期：详见说明书
CAS号：详见说明书
英文名： Semen cassiae
数量： 56
规格： 50T

产品名称：决明子染料法PCR鉴定试剂盒说明书
英文名称：Semen cassiae
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl     引物1（10pM）
2 μl     引物2（10pM）
2 μl     Taq酶（2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl      加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
戊唑醇分析标准品,99% 250mg 犬白介素1(IL-1)试剂盒 Canine Ierleukin 1,IL-1 ELISA Kit
塞来西布 HPLC≥98% 20mg 英文名称HumanEotaxin-2ELISAKit人噬酸性细胞趋化因子-2(Eotaxin-2)规格：96T/48T
水杨酸钠 HPLC≥99% 100mg 大鼠肾上腺髓质素基因引物对2OD
邻苯二甲酸二正辛酯 GC≥98% 1ml RatL-SelectinELISA试剂盒大鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒规格：96T/48T
酮康唑 HPLC≥98% 100mg 小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒，英文名： SAA ELISA Kit
恩诺沙星 HPLC≥98% 100mg 小鼠钙结合蛋白(CR)ELISA检测试剂盒MouseCalretinin,CRELISAKit 96T/48T
庆大霉素硫酸盐效价测定 200mg 人基质金属蛋白酶14(MMP-14)试剂盒 Human Maix Metalloproteinase 14,MMP-14 ELISA Kit
磺胺甲噁唑 HPLC≥98% 100mg RatCholecystokinin,CCKELISAKit大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒规格：96T/48T
甲氧苄啶 HPLC≥98% 100mg 10倍PBST浓缩缓冲清理溶液100毫升
头孢哌酮 HPLC≥98% 200mg MouseCholecystokinin,CCKELISA试剂盒小鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒规格：96T/48T
决明子染料法PCR鉴定试剂盒说明书硒吩(>98.0%(GC)) Selenophene 质量规格：>98.0%(GC) 小鼠胰岛素降解酶(IDE)ELISA试剂盒，英文名： IDE ELISA Kit
2,2',7,7'-四-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(T)) 2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene] 质量规格：>98.0%(T) 小鼠胰岛素受体(ISR)ELISA试剂盒，英文名： ISR ELISA Kit
1,3,6,8-四芘(>98.0%(T)) 1,3,6,8-Tetrabromopyrene 质量规格：>98.0%(T) 小鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒，英文名： ISR-β ELISA Kit
2,2',7,7'-四-9,9-联亚芴基(>98.0%(HPLC)) 2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-bifluorenylidene 质量规格：>98.0%(HPLC) 小鼠胰岛素受体底物1(IRS1)ELISA试剂盒，英文名： IRS1 ELISA Kit
酞菁铜(II)(α-型)(>90.0%(T)) Copper(II) Phthalocyanine (α-form) 质量规格：>90.0%(T) 小鼠胰岛素受体底物2(IRS2)ELISA试剂盒，英文名： IRS2 ELISA Kit
酞菁铜(II)(β-型)(>90.0%(T)) Copper(II) Phthalocyanine (β-form) 质量规格：>90.0%(T) 小鼠胰岛素样蛋白3(INSL3)ELISA试剂盒，英文名： INSL3 ELISA Kit
三(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-邻二氮杂菲)铕(Ⅲ)(>95.0%(T)) Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III) 质量规格：>95.0%(T) 小鼠胰岛素样蛋白5(INSL5)ELISA试剂盒，英文名： INSL5 ELISA Kit
3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基)香豆素(>98.0%(HPLC)(T)) 3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin 质量规格：>98.0%(HPLC)(T) 小鼠胰岛素样蛋白6(INSL6)ELISA试剂盒，英文名： INSL6 ELISA Kit
3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨基)香豆素(>98.0%(T)) 3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin 质量规格：>98.0%(T) 小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒组装/原装
4,4'-双(5-甲基-2-苯并恶唑基)芪(升华提)(>96.0%(HPLC)) 4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation) 质量规格：>96.0%(HPLC) 小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA检测试剂盒MouseInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit 96T/48T
小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒，英文名： TAP ELISA Kit 萘-1,4,5,8-四羧酸二酐(>95.0%(HPLC)(T)) Naphthalene-1,4,5,8-tetracarboxylic Dianhydride 质量规格：>95.0%(HPLC)(T)
小鼠胰岛素(INS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒组装/原装 1,4,5,8-萘四甲酰基二(>97.0%(N)) 1,4,5,8-Naphthalenetetracarboxdiimide 质量规格：>97.0%(N)
小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒，英文名： INS ELISA Kit 3,4,9,10－苝四甲酰二亚胺(>95.0%(N)) 3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Diimide 质量规格：>95.0%(N)
小鼠胰岛素降解酶(IDE)ELISA试剂盒，英文名： IDE ELISA Kit 硒吩(>98.0%(GC)) Selenophene 质量规格：>98.0%(GC)
小鼠胰岛素受体(ISR)ELISA试剂盒，英文名： ISR ELISA Kit 2,2',7,7'-四-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(T)) 2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene] 质量规格：>98.0%(T)
小鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISA试剂盒，英文名： ISR-β ELISA Kit 1,3,6,8-四芘(>98.0%(T)) 1,3,6,8-Tetrabromopyrene 质量规格：>98.0%(T)
小鼠胰岛素受体底物1(IRS1)ELISA试剂盒，英文名： IRS1 ELISA Kit 2,2',7,7'-四-9,9-联亚芴基(>98.0%(HPLC)) 2,2',7,7'-Tetrabromo-9,9'-bifluorenylidene 质量规格：>98.0%(HPLC)
小鼠胰岛素受体底物2(IRS2)ELISA试剂盒，英文名： IRS2 ELISA Kit 酞菁铜(II)(α-型)(>90.0%(T)) Copper(II) Phthalocyanine (α-form) 质量规格：>90.0%(T)
小鼠胰岛素样蛋白3(INSL3)ELISA试剂盒，英文名： INSL3 ELISA Kit 酞菁铜(II)(β-型)(>90.0%(T)) Copper(II) Phthalocyanine (β-form) 质量规格：>90.0%(T)
小鼠胰岛素样蛋白5(INSL5)ELISA试剂盒，英文名： INSL5 ELISA Kit 三(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-邻二氮杂菲)铕(Ⅲ)(>95.0%(T)) Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III) 质量规格：>95.0%(T)
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中Z小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

温馨提示：不可用于临床ZL。

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