特别提示:包括热敏尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG酶)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:热敏尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG酶)
英文名称:Heatlabile Uracil DNA Glycosylase
产品货号:MT0113
产品规格:100U|500U
本制品是来源于嗜冷海洋细菌经大肠杆菌表达纯化的的重组蛋白。该热敏UDG酶能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶,产生的缺嘧啶位点,在高温或高 pH 下,极易水解断裂。该酶对RNA无活性,主要用于PCR扩增产物的防污染。大肠杆菌来源的尿嘧啶-DNA 糖基化酶较为耐热,经95℃10min处理仍会残留有少量的尿嘧啶-DNA 糖基化酶活性,导致含有dU碱基的PCR产物的降解。而来源于嗜冷海洋细菌的热敏UDG在50℃ 5min即完全失活,在进行PCR扩增前,在PCR混合液中添加尿嘧啶-DNA 糖基化酶(热敏性),25℃10min即可消除PCR产物的残留污染,由于尿嘧啶-DNA 糖基化酶(热敏性)在PCR循环的94℃变性一步便可被灭活,因此不会影响新的含dU的PCR产物。
产品应用:· 去除单链或双链DNA中的尿嘧啶碱基;
· 去除 PCR 残存污染。
产品组成: | 组分 | 100U | 500U |
| 热敏UDG酶(1U/μl) | 100μl | 500μl |
储存条件:-20℃,可保存2年,避免反复冻融。
可选试剂:Strong Taq DNA Polymerase(货号:MT0022)
单位定义:在标准反应体系下,37°C每分钟催化 60 pmol 尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量为一个活性单位。
反应Buffer:本酶与绝大多数的PCR 聚合酶反应缓冲液都是兼容的,但在高离子浓度(>100mM)下活性会受到YZ。
贮存液:20mM Tris-HCl,50mM NaCl,1mM DTT,50% Glycerol,0.1% (w/v) Triton X-100,pH 7.5。
热失活:50℃,10min。
使用举例:1.配制反应体系:
| 加入物 | 加入量 |
| Strong Taq DNA Polymerase | 0.5μl |
| dNTP Mixture(2.5 mM each) | 2μl |
| 10×Hi PCR Buffer | 5μl |
| Heatlabile UDG(1U/μl) | 1μl |
| Primers (10μM each) | 1μl |
| Template DNA | 10ng-1μg |
| DEPC-treated Water | 至50μl |
2.25℃孵育 10min。
3.正常启动 PCR 程序。
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温馨提示:不可用于临床ZL。