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ox-LDL/MDA-Adducts Elisa (2 ctrls incl.)

产品信息
  • 产品名称:氧化低密度脂蛋白
    英文名称:ox-LDL/MDA-Adducts Elisa (2 ctrls incl.)    
    标本:100 uL serum, plasma
    规格:96 wells
    检测限:9 - 250 ng/ml   ///   4.13 ng/mL
    检测原理:
    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗ox-LDL/MDA-Adducts Elisa (2 ctrls incl.)    抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的ox-LDL/MDA-Adducts Elisa (2 ctrls incl.)    会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗ox-LDL/MDA-Adducts Elisa (2 ctrls incl.)    抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗ox-LDL/MDA-Adducts Elisa (2 ctrls incl.)    抗体与结合在包被抗体上的ox-LDL/MDA-Adducts Elisa (2 ctrls incl.)    抗体结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,HMGB-1浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中HMGB-1的浓度。


     试剂盒组成及试剂配制 :
    1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。 
    2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
    3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
    4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
    5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
    6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
    7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
    8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
    9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
    10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。


    注意事项:
    1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
    2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
    3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
    4. 请每次测定的同时做标准曲线,Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。
    5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 
    6. 底物请避光保存。
    7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
    8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
    9. 本试剂不同批号组分不得混用。
    10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
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    贝那普利相关物质F标准品  英文名称:  CAS:109010608
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    Fructus tsaoko  别 名 NAC3; Sodium channel protein type 3 subunit alpha; Sodium channel protein type III subunit alpha; Sodium channel protein, brain III subunit alpha; Voltage gated sodium channel subtype III; Voltage gated sodium channel subunit alpha Nav1.3; SCN3A_HUMAN.

    1mg/1ml
    0.2ml/200μg
    抗体来源 Rabbit
    克隆类型 polyclonal
    交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow
    产品类型 一抗
    研究领域 神经生物学 通道蛋白 细胞膜受体
    蛋白分子量 predicted molecular weight:226kDa  
    Lyophilized or Liquid
    KLH conjugated synthetic peptide derived from human SCN3A
    IgG
    纯化方法 affinity purified by Protein A
    Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
    产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
    操作流程如下:
    1)ox-LDL/MDA-Adducts Elisa (2 ctrls incl.)    待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 
    2)酶标板置4℃,包被过夜。
    3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
    4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
    5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
    6)洗板,同(4)。 
    7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
    8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
    9)洗板,同(4)。 
    10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 
    11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
    12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
    13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。


     
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