Insulin (rat/mouse)

 试剂盒组成及试剂配制 ：
1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。 
2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
产品名称：胰岛素（大鼠/小鼠）
英文名称：Insulin (rat/mouse)
标本：20 ul serum, plasma
规格：96 wells
检测限：0.2 - 10 ng/ml   // 0.2 ng/ml'2 ng - 10 ng per ml
检测原理：
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗Insulin (rat/mouse)抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的Insulin (rat/mouse)会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗Insulin (rat/mouse)抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗Insulin (rat/mouse)抗体与结合在包被抗体上的Insulin (rat/mouse)抗体结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，HMGB-1浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中HMGB-1的浓度。



注意事项：
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。


操作流程如下：
（1）Insulin (rat/mouse)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
除公司正在的Insulin (rat/mouse)，以下是也是公司正在打折产品：
马尿乌洛标准品  英文名称：Methenamine Hippurate  CAS:5714738
乌洛标准品  英文名称：Methenamine   CAS:100970
盐甲吡吩嗪标准品  英文名称：Methdilazine Hydrochloride  CAS:1229352
甲酰标准品  英文名称：Methazolamide  CAS:554574
美沙标准品  英文名称：Metharbital CIII  CAS:18570
富马噻吡二标准品  英文名称：Methapyrilene Fumarate  CAS:33032121
甲太林标准品  英文名称：Methantheline Bromide  CAS:53463
美他环素盐盐标准品  英文名称：Methacycline Hydrochloride   CAS:3963959
甲胆标准品  英文名称：Methacholine Chloride (AS)  CAS:62511
盐二甲标准品  英文名称：Metformin Hydrochloride   CAS:1115704
炔雌甲标准品  英文名称：Mestranol  CAS:72333
美索达嗪标准品  英文名称：Mesoridazine Besylate  CAS:32672698
美司那标准品  英文名称：Mesna  CAS:19767454
美沙拉嗪标准品  英文名称：Mesalamine   CAS:89576
美罗培南标准品  英文名称：Meropenem   CAS:119478567
右旋水解乳糖  进口、国产  英文名称:D(+)Galacturonicacid  含量:高纯，98%
柚  进口、国产  英文名称:Naringin  含量:熔点和沸点测定仪专用级
诱虫  进口、国产  英文名称:(Z)9Tricosene  含量:BR
玉米素核苷  进口、国产  英文名称:TranszeatinRiboside  含量:BR，99%
玉蜀黍淀粉  进口、国产  英文名称:Cornstarch  含量:AR，99%
愈创木  进口、国产  英文名称:2Methoxyphenol  含量:CP，99%
原儿茶  进口、国产  英文名称:3,4Dihydroxybenzaldehyde  含量:BR，90%
原儿茶  进口、国产  英文名称:3,4Dihydroxybenzoicacid  含量:超纯，99%
原花青素  进口、国产  英文名称:Procyanidin  含量:CP，35%
原矢车菊素B2  进口、国产  英文名称:ProcyanidinB2  含量:AR，99%
Radix trichosanthis  别 名 DOK1 (phospho S450); DOK1 (phospho Ser450); p-DOK1 (phospho S450); docking protein 1 (downstream of tyrosine kinase 1); Docking protein 1 (p62(dok)) (Downstream of tyrosine kinase 1) (pp62); docking protein 1 62kD (downstream of tyrosine kinase 1); Docking protein 1 62kD; Docking protein 1 62kD; Docking protein 1; DOK 1; DOK1; DOK-1; DOK1_HUMAN; Downstream of tyrosine kinase 1; p62(dok); P62DOK; pp62; pp62.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 心血管 细胞生物 信号转导 细胞凋亡 激酶和磷酸酶 G蛋白偶联受体 G蛋白信号
蛋白分子量 predicted molecular weight：62kDa  
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human DOK1 around the phosphorylation site of Ser450
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500