Insulin (mouse) ultrasensitive EIA

 试剂盒组成及试剂配制 ：
1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。 
2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
产品名称：超灵敏
英文名称：Insulin (mouse) ultrasensitive  EIA
标本：5 ul or 50 ul mouse serum, plasma or fluid
规格：96 wells
检测限：5ul sample: 0.22 - 7.1 ug/l, 50ul sample: 0.025 -
检测原理：
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗Insulin (mouse) ultrasensitive  EIA抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的Insulin (mouse) ultrasensitive  EIA会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗Insulin (mouse) ultrasensitive  EIA抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗Insulin (mouse) ultrasensitive  EIA抗体与结合在包被抗体上的Insulin (mouse) ultrasensitive  EIA抗体结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，HMGB-1浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中HMGB-1的浓度。



注意事项：
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。


操作流程如下：
（1）Insulin (mouse) ultrasensitive  EIA待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
除公司正在的Insulin (mouse) ultrasensitive  EIA，以下是也是公司正在打折产品：
盐莫西沙星标准品  英文名称：Moxifloxacin Hydrochloride   CAS:186826868
一水合标准品  英文名称：Morphine Monohydrate CII (AS)  CAS:6009810
盐莫雷西嗪标准品  英文名称：Moricizine Hydrochloride  CAS:29560585
酒石莫仑太尔标准品  英文名称：Morantel Tartrate   CAS:26155317
孟鲁司特标准品  英文名称：Montelukast Sodium  CAS:151767021
马来单十八酯标准品  英文名称：Monostearyl Maleate   CAS:2424626
谷氨一标准品  英文名称：Monosodium Glutamate (AS)  CAS:142472
单甘酯标准品  英文名称：Monoglycerides  CAS:68990534
乙标准品  英文名称：Monoethanolamine   CAS:141435
莫诺宗标准品  英文名称：Monobenzone  CAS:103162
莫能盐标准品  英文名称：Monensin Sodium   CAS:22373780
糖莫米松标准品  英文名称：Mometasone Furoate   CAS:83919237
盐吗茚标准品  英文名称：Molindone Hydrochloride  CAS:15622658
莫达相关物质E标准品  英文名称：Modafinil Related Compound E  CAS:1726029
莫达相关物质D标准品  英文名称：Modafinil Related Compound D  CAS:574425
钇氧  进口、国产  英文名称:Yttriumoxide  含量:BR，97%
蚁铵  进口、国产  英文名称:Ammoniumformate  含量:CP，93.5%
蚁  进口、国产  英文名称:Potassiumformate  含量:BR，95%
异基βD代半乳糖吡喃糖苷  进口、国产  英文名称:IPTG  含量:BR，98%
异基氧铝  进口、国产  英文名称:Aluminumisopropoxide  含量:BR，89%
异福尔  进口、国产  英文名称:Isophorone  含量:CP，99%
异柠檬脱氢酶  进口、国产  英文名称:Isocitratedehydrogenase  含量:BR，30u/ul
异  进口、国产  英文名称:Sodiumcyanate  含量:CP
异三十  进口、国产  英文名称:Squalane  含量:AR，97%
异维生素C  进口、国产  英文名称:DSodiumisoascorbiate  含量:AR，98.5%
Semen ziziphi spinosae    别 名 EPB72 like protein 2; HSPC108; OTTHUMP00000021320; SLP 2; SLP2; SLP-2; Stomatin (EPB72) like 2; Stomatin like 2; Stomatin like protein 2; STOML2; STML2_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 心血管 细胞生物 生长因子和激素
蛋白分子量 predicted molecular weight：39kDa  
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human STOML2/SLP2
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500