Adrenomedullin, (human) (1-52)

产品名称：肾上腺髓质素1-52
英文名称：Adrenomedullin, (human) (1-52)
标本：
规格：96 wells
检测限：
检测原理：
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗Adrenomedullin, (human) (1-52) 抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的Adrenomedullin, (human) (1-52) 会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗Adrenomedullin, (human) (1-52) 抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗Adrenomedullin, (human) (1-52) 抗体与结合在包被抗体上的Adrenomedullin, (human) (1-52) 抗体结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，HMGB-1浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中HMGB-1的浓度。

 试剂盒组成及试剂配制 ：
1. 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔）。 
2. 标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3. 样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 
9. 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 
10. 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

注意事项：
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 
6． 底物请避光保存。
7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9． 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
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羧甲基淀粉标准品（B型）  规格:400mg  英文名称：Sodium Starch Glycolate Type B
阿奇霉素N氧物标准品  规格:15mg  英文名称：Azithromycin NOxide
邻二甲羟甲纤维素酯标准品  规格:100mg  英文名称：Hypromellose Phthalate
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屈螺相关物质A标准品  规格:15mg  英文名称：
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聚二甲基硅氧标准品  规格:500mg  英文名称：Polydimethylsiloxane
1,4αD葡聚糖麦芽水解酶  进口、国产  英文名称:βAmylase  含量:BR，4000u/g
1,4βD葡聚糖葡糖苷水解酶  进口、国产  英文名称:Cellulase(TrichodermaVrideG)  含量:USP级，1：3000
1,4二甲二甲酯  进口、国产  英文名称:DMT  含量:CP，98%
1,4二碳酰二  进口、国产  英文名称:TPC  含量:CP，98%
1,4丁二双盐盐  进口、国产  英文名称:Putrescinedihydrochloride  含量:BR，98%
1,4二苏糖  进口、国产  英文名称:DTT  含量:CP，98%
1,4二羟基9,10蒽二  进口、国产  英文名称:溶剂橙861,4Dihydroxyanthraquinone  含量:实习级，90%
1,4二羟基丁  进口、国产  英文名称:BDO  含量:分子生物级，99%
1,4二氧基2  进口、国产  英文名称:VK4  含量:IND
1,4二  进口、国产  英文名称:1,4Dihydroxynaphthalene  含量:AR，98%
Rhizoma imperatae  别 名 PAB 1; PAB1; PABP 1; PABP1; PABP-1; PABPC 1; PABPC1; PABPC2; PABPL1v Poly A binding protein 1; Poly A binding protein cytoplasmic 1; Polyadenylate binding protein 1.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 免疫学 信号转导 转录调节因子
蛋白分子量 predicted molecular weight：70kDa  
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PABP
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
操作流程如下：
（1）Adrenomedullin, (human) (1-52) 待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。