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副溶血性弧菌核酸检测试剂盒（恒温荧光法）

产品信息
  • 副溶血性弧菌核酸检测试剂盒（恒温荧光法）
    副溶血性弧菌核酸检测试剂盒（恒温荧光法）
    ◆ 产品说明
    致病菌检测系列基于独特的恒温荧光检测技术，可针对食品、饲料等样品中的致病微生物的特异核酸片段进行扩增，仪器实时监测扩增过程中的荧光信号变化，自动判读结果。本产品用于副溶血性弧菌的检测。检出限为 103 CFU/ml。
    ◆ 产品组成（48 测试）
    试剂 含量
    A-VP-I 1200μL × 1 支
    B-I 55μL × 1 支
    C-I 1200μL × 1 支
    NG-I 50μL × 2 支
    PG-VP-I 50μL × 1 支
    ◆ 适用仪器
    Dhelix 1610、Dhelix 3210、ESE Tube Scanner、Genie II、Deaou-308c 等恒温荧光检测仪，ABI 7500，LightCycler480，CFX 96 等荧光 PCR 仪。
    ◆ 自备耗材和仪器
    ①灭菌 1.5mL 或 2.0mL 离心管；②灭菌 0.2mL PCR 管或八联管；③冰盒；④移液器（0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；⑤离心机；⑥涡旋混匀器；⑦金属浴

    ◆ 注意事项
    1．本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分或置于盛有 225 ml BPW 的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打 1 min～2 min。若样品为液态，不需要均质，振荡混匀。如需测定 pH 值，用 1 mol/ml 无菌 NaOH 或 HCl 调 pH 至 6.8 ± 0.2。无菌操作将样品转至 500 ml 锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于 36 ℃±1 ℃培养 8 h～18 h。
    如为冷冻产品，应在 45 ℃以下不超过 15 min，或 2 ℃～5 ℃不超过 18 h 解冻。
    详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。
    ◆ 实验操作
    将试剂完全解冻，各组分离心 30s。
    1. 试剂配制（试剂准备区，放置于冰盒中进行）：
    若有 N 个待检样品，则参照下表，按照 N+2 个数量计算各组分用量（N 个待检样品+1 个阴性对照+1 个阳性对照），将反应液置于 0.6ml 或者 1.5ml 离心管中，涡旋混匀，离心 30 秒，分装于 0.2ml PCR 管中，并向每管加入 1滴 C-I（约 20μl）。
    试剂 使用量
    A-VP-I 22×(N+2)μL
    B-I 1×(N+2)μL
    反应液总体积 23×(N+2)μL
    2．模板制备（样本制备区）
    建议使用试剂配套细菌组 DNA 提取系列产品，具体过程详见产品说明书。
    3．添加模板（模板添加区，放置于冰盒中进行）
    在步骤 1 中已含有反应液的 PCR 管中加入 2μl 模板，顺序为 NG-I、待测样品模板、PG-VP-I。涡旋混匀 30s，离心 1min，立即进行扩增反应。
    4. 扩增反应（扩增及产物分析区）
    ①恒温仪器 63℃条件下反应 30 min。
    ②若使用荧光定量 PCR 仪，则荧光基团选择 FAM，淬灭基团选择 None，将 63℃ 15 s，63℃ 45 s 作为一个循环，于 63℃ 45 s 处收集荧光信号，30 个循环。其他仪器请参照仪器说明书进行设置。
    ◆ 结果判定
    ①仪器自动判定结果，若显示“阳性”，则样品中含有副溶血性弧菌；若显示“阴性”，则样品中不含有副溶血性弧菌或含量低于检测限。
    ②在荧光定量 PCR 仪上，根据有无“S”型扩增曲线判定结果。若有“S”型扩增曲线，则样品中含有副溶血性弧菌；若无“S”型扩增曲线，则样品中不含有副溶血性弧菌或含量低于检测限。
    ★ NG 反应管结果显示“阴性”，PG 反应管结果显示“阳性”，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。
     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
    • 信息声明：本产品供应信息由仪器网为您整合，供应商为（上海康朗生物科技有限公司），内容包括 （副溶血性弧菌核酸检测试剂盒（恒温荧光法））的品牌、型号、技术参数、详细介绍等；如果您想了解更多关于 （副溶血性弧菌核酸检测试剂盒（恒温荧光法））的信息，请直接联系供应商，给供应商留言！
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