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铜绿假单胞菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
品牌:
KALANG/康朗生物
型号:
KL-11111
产地:
中国/上海
供应商:
上海康朗生物科技有限公司
供应商报价:
¥1396
标签:
铜绿假单胞菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)、铜绿假单胞菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)价格、铜绿假单胞菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)厂家、铜绿假单胞菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)、、上海康朗生物科技有限公司
产品信息
货号:
KL-11111
保存条件:
请于-20℃条件下保存
供应商:
上海康朗生物科技有限公司
保质期:
1年
英文名:
铜绿假单胞菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
数量:
大量
铜绿假单胞菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
铜绿假单胞菌核酸检测试剂盒(恒温荧光法)
◆
产品说明
致病菌检测系列基于独特的恒温荧光检测技术,可针对食品、饲料等样品中的致病微生物的特异核酸片段进行扩增,仪器实时监测扩增过程中的荧光信号变化,自动判读结果。本产品用于铜绿假单胞菌的检测。检出限为
103 CFU/ml
。
◆
产品组成(
48
测试)
试剂
含量
A-PA-I 1200μL × 1
支
B-I 55μL × 1
支
C-I 1200μL × 1
支
NG-I 50μL × 2
支
PG-PA-I 50μL × 1
支
◆
适用仪器
Dhelix 1610
、
Dhelix 3210
、
ESE Tube Scanner
、
Genie II
、
Deaou-308c
等恒温荧光检测仪,
ABI 7500
,
LightCycler480
,
CFX 96
等荧光
PCR
仪。
◆
自备耗材和仪器
①
灭菌
1.5mL
或
2.0mL
离心管;
②
灭菌
0.2mL PCR
管或八联管;
③
冰盒;
④
移液器(
0.5-10μL
,
10-100μL
,
100-1000μL
)及配套灭菌吸头;
⑤
离心机;
⑥
涡旋混匀器;
⑦
金属浴
◆
注意事项
1
.本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。
1
)区:试剂准备区。
2
)第二区:样本制备区。
3
)第三区:模板添加区。
4
)第四区:扩增及产物分析区。
★
分区之间Z好进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。
2
.实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。
3
.严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
4
.反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心
30
秒,并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。
5
.反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。
6
.不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。
7.
检出限为
10
3 CFU/ml
是以
1 ml 10
3CFU/ml
增菌液离心后收集菌体再提取的细菌基因组
DNA
作为模板。
◆
样品处理
参照《
SN/T2099-2008
进出口食品中绿脓杆菌检测方法》中的
7.1
和
7.2
处理样品,对样品进行前增菌,制备的菌液保存待用。
如为冷冻样品,应于
2~5℃
解冻,且不超过
18h
,若不能及时检验,应置于小于
-15℃
保存,非冷冻的易腐样品请于
-20℃
条件下保存,有效期
12
个月。
应尽可能及时检验,若不能及时检验,应置于
4℃
冰箱保存,并在
24h
内检验。
按无菌操作取检样
25 g
(
ml
)样品至
225 ml SCDLP
增菌液中,充分摇匀,于
36 ℃±1 ℃
培养
24 h±2 h
。详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。
◆
实验操作
将试剂完全解冻,各组分离心
30s
。
1.
试剂配制(试剂准备区,放置于冰盒中进行):
若有
N
个待检样品,则参照下表,按照
N+2
个数量计算各组分用量(
N
个待检样品
+1
个阴性对照
+1
个阳性对照),将反应液置于
0.6ml
或者
1.5ml
离心管中,涡旋混匀,离心
30
秒,分装于
0.2ml PCR
管中,并向每管加入
1
滴
C-I
(约
20μl
)。
试剂
使用量
A-PA-I 22×(N+2)μL
B-I 1×(N+2)μL
反应液总体积
23×(N+2)μL
2
.模板制备(样本制备区)
建议使用试剂配套细菌组
DNA
提取系列产品,具体过程详见产品说明书。
3
.添加模板(模板添加区,放置于冰盒中进行)
在步骤
1
中已含有反应液的
PCR
管中加入
2μL
模板,顺序为
NG-I
、待测样品模板、
PG-PA-I
。涡旋混匀
30s
,离心
1min
,立即进行扩增反应。
4.
扩增反应(扩增及产物分析区)
①
恒温仪器
63℃
条件下反应
30min
。
②
若使用荧光定量
PCR
仪,则荧光基团选择
FAM
,淬灭基团选择
None
,将
63℃ 15 s
,
63℃ 45 s
作为一个循环,于
63℃ 45 s
处收集荧光信号,
30
个循环。
其他仪器请参照仪器说明书进行设置。
◆
结果判定
①
仪器自动判定结果,若显示
“
阳性
”
,则样品中含有铜绿假单胞菌;若显示
“
阴性
”
,则样品中不含有铜绿假单胞菌或含量低于检测限。
②
在荧光定量
PCR
仪上,根据有无
“S”
型扩增曲线判定结果。若有
“S”
型扩增曲线,则样品中含有铜绿假单胞菌;若无
“S”
型扩增曲线,则样品中不含有铜绿假单胞菌或含量低于检测限。
★ NG
反应管结果显示
“
阴性
”
,
PG
反应管结果显示
“
阳性
”
,此次检测结果有效,否则无效。如重复检测结果仍为无效,请与技术支持人员联系。
温馨提示:不可用于临床ZL。
信息声明:
本产品供应信息由仪器网为您整合,供应商为
(上海康朗生物科技有限公司)
,内容包括
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