小鼠促黑色素细胞激素释放因子（MRF）ELISA检测试

南京卡米洛生物工程有限公司，其团队专注于ELISA酶免试剂盒研发生产十多年，主要从事细胞因子酶联免疫试剂盒及其相关产品的研发、生产、销售和技术上的服务、培训与咨询；以及国内外血清、培养基、细胞、抗体、实验室耗材的销售。
      Camilo ELISA试剂盒其稳定性、重复性、显色、梯度摸索均优于绝大部分国产试剂盒，同时具有价格优势。专业的客服支持随时的技术咨询，及时给出专业性的建议，售后及时专业。
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      卡米洛的产品覆盖面广，种类丰富，质量稳定可靠，其生产的ELISA试剂盒受到了客户的好评。本公司ELISA试剂盒定期提供SY装，欢迎各位老师使用、指导。
      试剂盒用途：科学研究
      试剂盒有效期：12个月
      试剂盒规格：96T
      试剂盒保存条件：-20℃保存（长期），4℃保存（短期）
      试剂盒回收率：70%-110%
      试剂盒批间差：≤12%
      试剂盒批内差：≤8%
      试剂盒特异性：系统和其它因子无交叉反应
      试剂盒试验时长：4-5小时

本试剂盒采用双抗体夹心法 ， 双抗体夹心原理 ， 是基于要测试的抗原具有二价以上的特性 ，能识别包被抗体，同时能识别检测抗体，具体过程如下：
（1）将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体，洗涤除去未结合的抗体及杂质，并用
无关蛋白封闭空余结合位点。
（2）加受检标本使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体
结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
（3）加生物素标记抗体，使固相免疫复合物上的抗原与生物素标记抗体结合。彻底洗涤未
结合的生物素标记抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
（4）加辣根过氧化物酶标记亲和素，使生物素标记抗体与辣根过氧化物酶标记的亲和素结
合。彻底洗涤未结合的酶标记物。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
（5）加入底物显色，即可计算标本浓度。
（6）注：一个抗体分子上可以标记上若干个生物素分子，一个生物素分子可以结合一个辣
根过氧化物酶标记的亲和素，从而带来了大量的辣根过氧化物酶结合到抗体上，比传统的直
接辣根过氧化物酶标记抗体具有更高的敏感性和放大效应。
【酶联免疫试剂盒检测原理】 
本实验采用双抗体夹心 ELISA 法。所提供的 ELISA Kit 是典型的夹心法酶联免疫吸附测定 试剂盒（ELISA）。预先包被的抗体为检测指标的单克隆抗体。检测相抗体为多克隆抗体， 经生物素（biotin）标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS 或 TBS 洗 涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过 PBS 或 TBS 的彻底洗涤后用底物 TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色 的深浅和样品中的待测因子呈正相关。  
【试验所需自备试验设备和器材】
  1. 酶标仪(450nm 检测波长滤光片，570nm 或 630nm 校正波长滤光片) 。
2. 洗板机（可调注液量，保证每孔 350μl 洗液而不溢出）。
3. 超净工作台，生物安全柜，通风柜。
4. 高精度单道加液器（量程为 0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).
5. 高精度多道加液器（8 道或 12 道，量程为 50-300μl).
6. 37℃恒温箱。
7. 低温离心机。
8. 电冰箱（4℃,-20℃,-86℃）.
9. 分析天平。
10. 剪刀，镊子，钳子等。
11. 漩涡混合仪，低频振荡器等。