Western细胞裂解液北京供应商

特别提示：包括Western细胞裂解液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：Western细胞裂解液
产品货号：HR0263
产品规格：50ml|100ml

Western组织细胞蛋白裂解液是一种在非变性条件下裂解细胞和组织的裂解液。
能裂解细胞并充分释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。裂解蛋白产物限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的细胞和组织样本，主要用于Western，免疫沉淀和免疫共沉淀等。

储存条件：裂解液室温保存；蛋白酶YZ剂-20℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
1．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2．整个过程须保持样品处于低温状态。
3．如果试剂不能短时间内用完，蛋白酶YZ剂混合物不可以一次全部加入提取液。
4．螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

使用方法：
根据样本数量，每500μl裂解液中加入2μl蛋白酶YZ剂。
A．细胞裂解
1．取5-10×106个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2．用冷 PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3．每 5×106个细胞中加入500μl冷的裂解液(每106个细胞加100μl非变性裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100μl～150μl，或一个75 cm2培养瓶加1～2 ml。裂解液和细胞应充分接触。如果非变性裂解液不足量，细胞裂解效率将会降低)，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
4.在 4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
5．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
B．组织裂解
1．取100mg组织样本剪碎，加入1ml裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
2．将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。
3．将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。

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