RabbitS, 兔皮肤成纤维细胞

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RabbitS, 兔皮肤成纤维细胞可靠承诺：每一株细胞出厂前都经过严格处理及检查，保证细胞复苏2-3代内,免于细菌、真菌、支原体感染，保证成活率。
细胞来源：ATCC/中科院/武汉细胞库等地引进
细胞名称: RabbitS, 兔皮肤成纤维细胞
种属来源: 兔
组织来源: 皮肤
细胞形态: 成纤维细胞样
生长特性: 贴壁生长
培养基: DMEM（内含2mM L-glutamine）+10%新生牛血清（NCS）
生长条件: 气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃, 
传代方法: 1：2至1：6，每周2次。
冻存条件: 90% 完全培养基+10% FBS，液氮储存
支原体检测: 阴性
应用: 该细胞可以作为转染宿主细胞。
RabbitS, 兔皮肤成纤维细胞复苏传代过程

RabbitS, 兔皮肤成纤维细胞收到细胞培养处理方法：

1. 首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。
   2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4H，以便稳定细胞状态。
   3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比列、所需细胞因子、传代比列、换液频率等。
   4、静置完成后，取出细胞培养瓶、镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据），建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
   5、贴壁细胞；若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
   6、悬浮细胞，将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%可将细胞悬液分至2个培养瓶内培养，补加培养基5ml;若细胞密度未超过80%将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作。

单层贴壁细胞的传代培养
为了保证单层贴壁细胞的对数生长，需要定期传代。当细胞生长接近指数生长后期(汇合率大约70%到90%)，准备传代。
单层贴壁细胞传代，需要打断细胞之间的连接。对于比较松散的连接，猛击培养瓶侧壁，可以分离细胞。很多情况下，需要胰蛋白酶/EDTA的蛋白水解酶来消化。对于一些细胞系，需要采用刮等机械方法分离细胞。细胞分离成为单细胞悬液后，稀释到适当的密度并转移到新的培养瓶中，在适当的生长培养基中，细胞将再贴壁生长和分裂。
由于每种细胞都是特有的，孵化时间和温度、清洗次数或溶液配方可能会有所不同。分离过程中，应用显微镜密切观察细胞，以防止细胞损伤。这个过程根据容器使用合适的培养体积。
悬浮细胞的传代培养相对于单层贴壁细胞来说，悬浮细胞的传代更具有优势，单层贴壁细胞需要蛋白水解酶，会造成细胞损伤。而悬浮细胞可以使用稀释的方法来传代，细胞生长没有延迟，对实验室空间要求较小，传代培养是线性放大的。比如细胞可以在发酵罐中培养。