"C518细胞|大鼠膝关节退变软骨细胞
GD-C００１８６３２A６６２４８
细胞背景资料：膝关节退变软骨细胞
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不好。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
C518细胞|大鼠膝关节退变软骨细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞复苏基本方法：１．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。３．剪开纱布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加１０ml培养液，吹打使细胞悬浮。４．低速离心（５００～１０００转/分）５分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。５．加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。收到T２５ flask细胞时，处理方式为：在寄送过程中，为避免起泡造成细胞脱落死亡，T２５ flask均加满培养基。请检查flask外观，并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象，若有任何问题，不要打开盖子，请立即通知细胞实验室。将原封之T２５ flask静置于３７°C，５%CO２培养箱中，使细胞回温至３７°C，并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后，于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用)，仅留约５-１０ml培养基于flask内，依一般培养方式再将细胞置入培养箱中，或细胞已长满盘，则将细胞做传代培养。
JeKo-１细胞系；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H１５８１细胞系；细胞生长特性：混合型；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：每周换液２次。
GLC-８２细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NeHepLxHT细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：５-１：１０传代，每周换液２-３次
NCI-H１８７６[H１８７６]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MLE-１２细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
C518细胞|大鼠膝关节退变软骨细胞
细胞生长特性：贴壁
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次Z好只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞形态特性：详见细胞说明书
BMSC细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SNU-３９８细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２传代
A３７５细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２传代
Vero E６细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MDBK细胞系；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
HCT１１６[HCT１１６]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
C518细胞|大鼠膝关节退变软骨细胞
HCT１１６[HCT１１６]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HCC-９２０４细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SPA-A１细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SW１３细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HLCL９B１０细胞系；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MHCC-９７L细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
KYSE-１５０细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
HUP-T３细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
NCI-H２１９６[H２１９６]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H１７７０细胞系；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：随细胞的生长而换液
GIST-４３０细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
LAN-５细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HPAF-II细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
EAhy９２６细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２传代
GOTO细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：１０^４ cells/ml
TE３细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
C８-D１A细胞系；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
U３７３细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Toledo细胞系；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：每２-３天换液
H２１２６细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MDA-MB-３３０细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Hs ５７８Bst细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SiHa细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：３传代，２-３天换液一次
CHO-S细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
RCM-１细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：４传代，每周换液２—３次
H１６４８细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H３４５细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
LAN-５细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
KP-N-RT-BM-１细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成神经细胞；细胞传代方法：１：２传代
２９３ [HEK-２９３]细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NUTU-１９细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
CEC细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
WM３５细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Hs ８４０.T细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：１：４—１：８传代，每周换液２—３次
LA７９５细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
CMECs细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HCEC-B４G１２细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
EMT６细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H１６８８[H１６８８]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HUSMC细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HCC１５００细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每３-５天换液
HuUVECs-１１细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
RCC４细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NEI-H２０９细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H１６７２细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MPC-１１细胞系；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
A２５３细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
ACHN细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２-１：３传代，每周２-３次。
SNU-１６细胞系；细胞生长特性：悬浮聚集；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：３-４天换液１次。
NHEK细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
６７NR细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HPC-Y５细胞系；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
BHK细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：１：２传代，每周换液１-２次。
NCI-H７７４[H７７４]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MA８９１细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Hepa１-６细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２传代
C518细胞|大鼠膝关节退变软骨细胞
RD细胞系；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：梭型和大的多核细胞；细胞传代方法：１：２-１：４传代，３-４天换液１次。
NK-９２MI细胞系；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H１４３５细胞系；细胞生长特性：贴壁生长，松散；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：３-１：６传代，每周换液２-３次
NCI-H１４３６[H１４３６]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H２２８６[H２２８６]细胞系；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
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