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KG-1 急性髓系细胞白血病细胞系 技术复苏

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  • KG-1 急性髓系细胞白血病细胞系 技术复苏
    细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
    细胞株(系)的使用,为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的,长期连续传代的细胞,不仅消耗大量的人力和物力,而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化,因而细胞失去原有的遗传特性,有时还会由于细胞污染而造成传代中断,种子丢失。因此,在实际工作中常需冻存一定数量的细胞,以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。目前,细胞冻存Z常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻,细胞内外的水分会很快形成冰晶,从而引起一系列不良反应。如细胞脱水使局部电解质浓度ZG,pH值改变,部分蛋白质由于上述原因而变性,引起细胞内部空间结构紊乱,溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶,使细胞内结构成分造成破坏,线粒体肿胀,功能丢失,并造成能量代谢障碍。胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变,使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多,随冷冻温度的降低,冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤,而致细胞死亡。因此,细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分,减少细胞内冰晶的形成。采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质分子量小,溶解度大,易穿透细胞,可以使冰点下降,提高细胞膜对水的通透性,且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外,减少胞内形成冰结晶的机会,从而减少冰晶对细胞的损伤。
    细胞形态特性:原粒细胞
    NCI-H1693[H1693]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    HOC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肝;卵圆细胞
    HOPC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:少突胶质前体细胞
    U251 MG细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:U-251 MG分离至一位患者的胶质母细胞瘤组织。
    细胞生长特性:悬浮生长
    KG-1 急性髓系细胞白血病细胞系 技术复苏
    购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因比较复杂,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浑细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟,转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r为离心机转轴ZX与离心套管底部内壁的距离;rpm为离心机每分钟的转数;RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
    细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
    细胞背景资料:详见相关文献介绍
    细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
    【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞Z好,消化温度是37℃;2)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度;(3)吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】1)吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液;2)吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中;3)平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟;4)弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】1)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。要做好标记;2)分装:将细胞悬液吸出分装至2~3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖;3)继续培养:用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。
    Jurkat D,E细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    NCI-H345[H345]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    End1/E6E7细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:子宫内膜;女性;HPV16转化
    HSF细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    SCC-4细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代
    H9C2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    Mv 1Lu(NBL-7)细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    IEC-6细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    MKN-28(MKN-74)细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:STR分型鉴定确定MKN28细胞来源于MNK74细胞,MKN74细胞为中等分化腺癌细胞,曾经为亚二倍体,细胞生长缓慢。
    Duckembryo细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:成纤维母细胞样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    KG-1 急性髓系细胞白血病细胞系 技术复苏
    NCI-H2073细胞系;细胞传代方法:1:3-1:6传代 ;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    UACC-812细胞系;细胞传代方法:1:3传代;5-7天1次。 ;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:该细胞是由Liebovitz A等于1986年从一名43岁的白人女性乳腺导管癌患者的乳腺切除肿瘤组织中分离建立的;手术前该病人曾接受过广泛的化疗。该细胞HER-2/neu癌基因序列有15倍的扩增;雌激素受体ER、孕激素受体PR和糖蛋白P阴性。
    SHG44细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    SNU-398细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    TM3细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:TM3细胞在LH作用下cAMP产量升高,但对促卵泡激素没有响应。对LH的响应持续时间与血清批次有关。在LH存在下,细胞可以代谢胆固醇。检测发现鼠痘病毒阴性。
    rUCMSCs细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:脐带;间充质干细胞
    RKO-E6细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    SUP-B15细胞系;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞生长特性:悬浮生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    MH-22A细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肝癌;C3HA
    HRA-19细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    MG-63细胞系;细胞传代方法:1:4-1:8传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:该细胞源自14岁患有骨肉瘤的白人男性;聚次黄嘌呤核苷-聚胞嘧啶核苷酸、和D可以诱导产生高水平的干扰素。该细胞表达TGF-β受体Ⅰ和Ⅱ。
    HCC94细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    COLO320HSR细胞系;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:半贴壁生长;细胞背景资料:该细胞1984年建系,源自一位33岁患有大肠腺癌男性经5-fuZL后的腹水。
    HCC94细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    MDCK-2细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    SNU-638细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    HS-5细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    HCoEpiC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:结肠上皮细胞
    LS174T细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮样;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:LS 174T是LS 180 (ATCC CL 187)结肠腺癌细胞株的胰蛋白酶化变种。 它比亲本更易传代,象LS 180一样生成大量的癌胚抗原(CEA)。 电镜研究表明有丰富的微丝和细胞质粘液素液泡。 直肠抗原3阳性。 p53抗原表达阴性,但mRNA表达阳性。 与ATCC CL-187来源于同一个肿瘤。LS 174T细胞角蛋白染色阳性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表达呈阳性。 癌基因k-ras和sis的表达未做检测。
    SMC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    HDLEC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    PKN-012细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    Hs832.Tc细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:卵巢,恶性囊肿
    MLM细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:急性粒白血病
    PG13细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胚胎;成纤维细胞
    KG-1 急性髓系细胞白血病细胞系 技术复苏
    NCI-H716 [H716]细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:悬浮;细胞背景资料:盲囊腺癌;腹水转移;男性
    NCI-H1993细胞系;细胞传代方法:1:2—1:6传代;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    P3X63Ag8细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    COV434细胞系;细胞传代方法:1:2传代;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    Hep 3B2.1-7细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肝癌;男性
    CCD-966SK细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    TEC细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:胸腺;上皮细胞
    OSKM-1细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:诱导型多能干细胞
    NCI-H1838细胞系;细胞传代方法:1:3-1:4传代;每周换液2次;细胞形态特性:上皮细胞;细胞生长特性:贴壁生长;细胞背景资料:详见相关文献介绍
    IPI-2I细胞系;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞生长特性:贴壁;细胞背景资料:肠;上皮细胞;SV40转化
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