A431人表皮癌细胞系(通过STR鉴定)

名称：A431人表皮癌细胞系(通过STR鉴定)
别称：A431; A431/P
种属：人
年龄（性别）：女；85岁
生长特性：贴壁细胞
细胞形态：上皮细胞样
生长培养基：DMEM高糖(PM150210)＋10% FBS(164210-500)＋1% P/S(PB180120)
推荐传代比例：1:3-1:4
推荐换液频率：2-3天/次
冻存条件：冻存液：50%基础培养基+40%胎牛血清+10%DMSO
温度：液氮
培养条件 ：
气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃
背景描述：A431人表皮癌细胞系(通过STR鉴定)源自一位85岁女性，是由D·J·Giard等人建立的一系列细胞株中的一株。A-431细胞在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的NIH瑞士小鼠中形成类似于恶性黑素瘤快速增长的皮下肿瘤，在普通成纤维细胞和琼脂上形成克隆。A-431细胞是一个超三倍体人细胞株。

细胞计数
原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目即可换算出每mL细胞悬液中的细胞数量。

操作步骤：

1.将计数板及盖玻片擦拭干净，并将盖玻片盖在计数板上；

2.轻轻吹打细胞悬液，使细胞均匀分布；吸出少许细胞悬液滴在细胞入口，使细胞悬液充满盖玻片和计数板之间，静置1-2min，使细胞沉降；注意盖玻片下不要有气泡，也避免细胞悬液进入旁边的槽中；

3.在显微镜下对A/B/C/D四个大格内的细胞进行计数，压在大格四周边线上的细胞只计数压在2条边线上的细胞（如右侧和下方）；若镜下有2个细胞组成的细胞团，则应按单个细胞计算；若细胞团数量较多，占细胞总量的10%左右，则说明细胞分散不好会导致计算不准确，需要重新制备细胞悬液；

4.按公式计数细胞数量：细胞数/mL=四个大格内细胞总数×104/4

（每一个大格的体积为长1mm×宽1mm×高0.1mm=0.1mm3，1mL=1000mm3，因此计算时需×104）