RIPA Lysis Buffer (Strong） (Without Enzyme Inhibitors） RIPA裂解液（强）（不含蛋白酶/磷酸酶YZ剂）

产品描述RIPA裂解液（RIPA Lysis Buffer），本意为RadioImmunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对组织和细胞都有较好的裂解作用。RIPA的配方有很多种，根据其裂解强度的不同，大致可分为强、中、弱三类，应用上会有一些差异【见附表1】。本品为裂解性较强的1×RIPA裂解液，不含蛋白酶和磷酸酶YZ剂，主要成分为50mM Tris-HCl（pH 7.4），150mM NaCl，1% TritonX-100,1%脱氧胆酸钠，0.1% SDS。使用本品，用户可根据具体用途添加特定YZ剂或不添加YZ剂。经本品裂解所得的蛋白样品，适用于蛋白免疫印迹（Western Blot），免疫沉淀（IP）等实验。经本品裂解收集的蛋白样品，可使用增强型BCA蛋白浓度测定试剂盒（货号：MP1902-500T）测定总蛋白浓度。由于本品含有较高浓度的去垢剂，不适合用Bradford法来测定总蛋白浓度。保存与运输方法 1）若频繁使用本品，可以短期4℃保存。2）若需添加蛋白酶或磷酸酶YZ剂，可使用我司的广谱蛋白酶YZ剂混合物（#MP1610），广谱磷酸酶YZ剂混合物（#MP1612），以及PMSF（#MP1601），或者自行准备。4） 使用方法A， 培养的细胞样品2）贴壁细胞：吸除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍（如果血清中的蛋白没有干扰，可忽略此步）。按照六孔板的每孔细胞加入150-250悬浮细胞：离心收集细胞，用手指弹散细胞。按照六孔板的每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必须分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。【裂解液用量说明】：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。B， 组织样品