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RIPA Lysis Buffer (Strong) (Without Enzyme Inhibitors) RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶YZ剂)

产品信息
  • 产品描述RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),本意为RadioImmunoprecipitation Assay,是一种传统的细胞组织快速裂解液,对组织和细胞都有较好的裂解作用。RIPA的配方有很多种,根据其裂解强度的不同,大致可分为强、中、弱三类,应用上会有一些差异【见附表1】。本品为裂解性较强的1×RIPA裂解液,不含蛋白酶和磷酸酶YZ剂,主要成分为50mM Tris-HCl(pH 7.4),150mM NaCl,1% TritonX-100,1%脱氧胆酸钠,0.1% SDS。使用本品,用户可根据具体用途添加特定YZ剂或不添加YZ剂。经本品裂解所得的蛋白样品,适用于蛋白免疫印迹(Western Blot),免疫沉淀(IP)等实验。经本品裂解收集的蛋白样品,可使用增强型BCA蛋白浓度测定试剂盒(货号:MP1902-500T)测定总蛋白浓度。由于本品含有较高浓度的去垢剂,不适合用Bradford法来测定总蛋白浓度。保存与运输方法 1)若频繁使用本品,可以短期4℃保存。2)若需添加蛋白酶或磷酸酶YZ剂,可使用我司的广谱蛋白酶YZ剂混合物(#MP1610),广谱磷酸酶YZ剂混合物(#MP1612),以及PMSF(#MP1601),或者自行准备。4) 使用方法A, 培养的细胞样品2)贴壁细胞:吸除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可忽略此步)。按照六孔板的每孔细胞加入150-250悬浮细胞:离心收集细胞,用手指弹散细胞。按照六孔板的每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必须分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。【裂解液用量说明】:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。B, 组织样品
    温馨提示:不可用于临床ZL。
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