均一化cDNA文库构建
- 供应商:上海宝吉生物技术有限公司
- 供应商报价:¥30000
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均一化cDNA文库构建
1. 服务流程
1.1 RNA提取
1.2 mRNA分离
1.3 cDNA合成与均一化处理
1.4 cDNA长度分级
1.5 分级后的cDNA与目的载体的all-direct重组
1.6 重组产物电转化
1.7 均一化cDNA文库的鉴定
a) 检测库容量(总CFU)
b) 随机挑取32个克隆子,PCR方法检测平均插入片段大小。
c) 抽提均一化cDNA文库的混合质粒(大抽),qPCR检测均一化前后两个文库总质粒中两个看家基因的表达量差异,以判断均一化的效果。
2.送样要求
2.1 针对每个文库,客户需提供200ug以上的RNA或2g以上的组织样本。
3.发货内容
3.1 我们提供构建好的cDNA文库的甘油菌液(含20%甘油的LB培养基),随机克隆子的PCR鉴定图谱,文库构建报告。
4.质量标准
4.1 文库库容量:大于1*10^5 CFU。
4.2 平均插入片段:大于1.2Kbp。
4.3 阳性率:大于95%。
4.4 均一化后相对于均一化前看家基因拷贝数降低50倍以上。
5.服务时间
25个工作日内