pAAV-IRES-hrGFP腺相关质粒

基本信息

启动子:	CMV，T7
复制子:	pUC ori，f1 ori
终止子:	hGH poly(A) signal
质粒分类:	病毒系列，腺病毒相关克隆载体
质粒大小:	6.1kb
原核抗性:	Amp
克隆菌株:	Stbl3
培养条件:	37℃，有氧 LB
表达宿主:	哺乳细胞
诱导方式:	无须诱导，瞬时表达
5'测序引物:	T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'测序引物:	hGH-PA-R: CCAGCTTGGTTCCCAATAGA

质粒简介
    该质粒pAAV-IRES-hrGFP载体含有在哺乳动物细胞中基因的高水平表达的CMV启动子和其他元素时。该载体还包含构建反向末端重复序列（ITRS），其中直接病毒复制和包装。质粒pAAV-IRES-hrGFP可容纳插入≤1.7 KB。
质粒图谱


pAAV-IRES-hrGFP腺相关质粒使用说明：
    
     1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
     2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
     3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
     4、42℃热激90s，再冰浴2min；
     5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
     6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
     7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
     8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
     9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
 
pAAV-IRES-hrGFP腺相关质粒注意事项：
 
      1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
      2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。