Flag-TST双标签免疫沉淀/免疫共沉淀试剂盒

Flag-TST描述
双标签免疫沉淀/免疫共沉淀试剂盒，包含足够完成 20 个反应的试剂，每个TAP反应，TST树脂需要 100μL，flag树脂需要 50 μL。

Flag-TST 贮存条件
收到本产品后flag树脂和洗脱液于 -20 ℃ 贮存，其他产品于 4 ℃ 贮存。

Flag-TST 产品简介
辉骏生物双标签免疫沉淀  /免疫共沉淀试剂盒能够GX完成单标签融合蛋白或双标签融合蛋白免疫共沉淀实验。以双标签融合蛋白做TAP为例，将Flag标签、TST标签与诱饵蛋白在目的细胞中融合表达，步用TST树脂来粗调取诱饵蛋白的互作蛋白，然后将这一步的洗脱液加入到第二步Flag树脂中来更进一步调取诱饵蛋白的互作蛋白。本试剂盒不仅可以调取Flag或TST单标签融合蛋白及其互作蛋白，又可以调取Flag和TST双标签融合蛋白及其互作蛋白，另外相对于传统的Flag-HA  IP试剂盒，本试剂盒具有产物中不含抗体且蛋白没有变性的优点，其产物做Western Blot检测时不会受IgG影响，本试剂盒中亲和材料与诱饵蛋白结合多且强，调取的互作蛋白更多。

FLAG-tag 是一段由8个氨基酸残基组成，N-DYKDDDDK-C (1012 Da)，其作用是标记蛋白。在蛋白表达和定位研究中，可以通过基因工程技术手段将所要研究的目的基因和FLAG-tag基因序列连接起来，可以连接在目的蛋白的C端或N端，然后将整合后的基因转入细胞中或胚胎干细胞亦或受精卵中。TST标签是strep-tagⅡ（Trp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys）的升级版，由两个strep-tagⅡ外加连接臂组成，与融合蛋白结合能力更强，结合位点更多，其作用是标记蛋白。在蛋白表达和定位研究中，可以通过基因工程技术手段将所要研究的目的基因和TST-tag基因序列连接起来，可以连接在目的蛋白的C端或N端，然后将整合后的基因转入细胞中或胚胎干细胞亦或受精卵中。

流程简述（TAP）
1. 将细胞裂解液与TST树脂，室温下孵育 1-2 小时，或 4 ℃过夜。
2. 在室温下，经过漂洗，洗脱得到洗脱液1。
3. 在洗脱液1中加入到Flag树脂中，室温孵育 2-3 小时，或 4 ℃过夜。
4. 室温下，漂洗，加洗脱缓冲液B得到洗脱复合物。

所需额外仪器
• 磷酸盐缓冲液（PBS，100 mM 磷酸钠，100 mM 氯化钠；pH 7.2）
• Flag抗体
• TST抗体
• 混匀仪

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