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一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次品Pai

产品信息
  • 实验要点：
    1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  
    2．在Z适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
    3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全YZRNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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    一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次品Pai详细介绍：

    公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
    1、RNA纯化系列产品
    2、DNA纯化系列产品
    3、电泳及回收系列产品
    4、探针标记及检测系列产品
    5、核酸扩增系列产品
    6、克隆表达系列产品
    7、基因组研究系列产品
    8、蛋白质研究系列产品
    9、细胞生物学研究系列产品
    10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
    以下是一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次品Pai的相关产品：
    SDS-PAGE 分离胶配胶液500mL  LY294002(PI3K YZ剂 )1mg
    SDS-PAGE 上样液，5×1mL  Lucigenin( 光泽精 )10mg
    SDS-PAGE 上样液，5×10mL  LPS(TLR4 激活剂 )0.5mg
    SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )5L  Lovastatin(HMG-CoA Reductase YZ剂 )10mg
    SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )20L  L-NMMA( 总 NOS YZ剂 )5mg
    分子生物学级糖原干粉1.0g  脑膜细胞生长因子5mL
    分子生物学级糖原溶液，10mg/mL1mL  木瓜蛋白酶YZ剂溶液，0.5 mg/mL10mL
    微量核酸沉淀剂10mL  木材 DNAout50 次
    超快非醇核酸沉淀剂30 次  膜结合 DNA 清除试剂盒50 次
    超快非醇核酸沉淀剂100 次  明胶溶液，2%，PCR 级1.5mL
    内皮细胞生长因子5mL  DTT，蛋白级5g
    脑膜细胞生长因子5mL  Doxorubicin(Adriamycin) 阿霉素100μL
    尿道上皮细胞生长因子5mL  dNTP 溶液，2.5mM5mL
    平滑肌细胞生长因子5mL  dNTP 溶液，2.5mM0.5mL
    平滑肌细胞生长因子 ( 不含血清 )5mL  dNTP 溶液，100mM 5mL
    不动杆菌属   戴尔根霉
    胰蛋白胨大豆琼脂表面培养基60mm/25cm2   齿双歧杆菌
    香蕉炭疽盘长孢菌   炭球菌
    乙酸钙不动杆菌   多型孢毛霉
    尖鳞黄伞   苏云金芽胞杆菌山东亚种Bacillusthuringiensissubsp.shandongiensis
    发酵性酵母   草菇
    天蓝色链霉菌   福氏志贺氏菌
    田菁根瘤菌   杜鹃盘多毛孢霉 Pestalotia rhododendri
    木醋杆菌   石刁柏(芦笋)拟茎点霉 Phomopsis asparagi
    肺炎链球菌ATCC49619冻干粉   烟草疫霉* Phytophthora nicotianae
    一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次品Pai红色红曲霉   泡盛曲霉
    头状秃马勃   椭圆酿酒酵母  葡萄酒生产用菌
    发酵性酵母   椭圆酿酒酵母  由AS2.346酵母育成,高温型水果酒酵母
    侵蚀侏儒囊菌   肺形侧耳、柳树菌、树窝  食用
    硫乙醇酸盐流体培养基40ml   玫瑰红琼脂培养基70mm
    操作步骤:
    1. 一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次品Pai匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
    b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
    c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
    2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
    3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
    5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
    6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
    7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
    8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。

     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
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