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EcoR I-Not I-BamH I 接头1nmol品Pai

产品信息
  • 点击了解更多“克必隆”克隆及表达产品：
    EcoR I-Not I-BamH I 接头1nmol品Pai详细介绍：

    公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
    1、RNA纯化系列产品
    2、DNA纯化系列产品
    3、电泳及回收系列产品
    4、探针标记及检测系列产品
    5、核酸扩增系列产品
    6、克隆表达系列产品
    7、基因组研究系列产品
    8、蛋白质研究系列产品
    9、细胞生物学研究系列产品
    10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
    以下是EcoR I-Not I-BamH I 接头1nmol品Pai的相关产品：
    DNA 电泳分子量标准 (100-1500 bp)50 次  青霉素 G 钾盐溶液 ,200mg/mL1 Mu
    DNA 电泳分子量标准 (100-5000 bp)50 次  亲和硅烷 25mL
    DNA 电泳分子量标准 (300-10000 bp)50 次  亲和层析柱6 mL
    DNA 电泳分子量标准 (2)（50-400 bp）50 次  亲和层析柱50 mL
    DNA 电泳分子量标准 (2)（300-5000 bp）50 次  亲和层析柱30 mL
    口腔采样拭子 50 支  杂交袋20 个
    鼻腔采样拭子 50 支  预稀释 BSA 蛋白标准品7×1mL
    DNA 采样拭子 50 支  预稀释 BGG 蛋白标准品7×1mL
    宫颈采样拭子 A 50 支  预染蛋白质电泳分子量标准 (43.0-200.0 KD)10 次
    宫颈采样拭子 B 50 支  预染蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)10 次
    预混型丙 - 甲叉双丙烯干粉 (29:1)100g  可保种型蓝白 T 载体50ng
    第四章 探针标记及检测产品  壳聚糖磁珠2mL
    随机引物法 DNA 探针标记试剂盒5次  考马斯亮蓝 R-25010g
    随机引物法 DNA 探针生物素标记试剂盒5次  考马斯亮蓝 R-250 染液250mL
    PCR 法 DNA 探针标记试剂盒5次  考马斯亮蓝 G-25010g
    白黄链霉菌   葱头伯克氏菌
    泛养副球菌   黄绿绿僵菌  生物FZ用菌。
    金黄色葡萄球菌ATCC43300冻干粉   绿色木霉=木素木霉  产纤维素酶。
    拟康氏木霉   金龟子绿僵菌小孢变种  生物FZ
    粗糙链孢霉   坏死梭杆菌坏死亚种
    戴尔根霉   酵母
    立枯多核菌   黄直丝链霉菌
    链格孢   田菁根瘤菌  细菌肥料
    亚膜汉逊酵母   苜蓿根瘤菌  细菌肥料
    长野解普鲁兰杆菌   豌豆根瘤菌
    EcoR I-Not I-BamH I 接头1nmol品Pai根霉属的菌   紫色直丝链霉菌
    金针菇   苏云金芽胞杆菌柏氏变种Bacillusthuringiensisvar.berliner
    苜蓿根瘤菌   李克犁头霉或伞枝梨头霉
    明亮发光杆菌   产气肠杆菌冻干粉
    化脓性链球菌ATCC19615冻干粉   法氏柠檬酸杆菌
    操作步骤:
    1. EcoR I-Not I-BamH I 接头1nmol品Pai匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
    b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
    c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
    2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
    3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
    5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
    6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
    7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
    8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
    实验要点：
    1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  
    2．在Z适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
    3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全YZRNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要
     
    温馨提示：不可用于临床ZL。
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