MMLV逆转录病毒包装

1. MMLV逆转录病毒基因表达载体系统是一种非常GX的，能把外源基因稳定整合到哺乳动物细胞基因组的系统，也是在iPS细胞制备中特别受欢迎的基因转导方法。MMLV逆转录病毒载体来源于莫洛尼（氏）鼠白血病病毒，属于逆转录病毒家族，野生型逆转录病毒基因组是线性双正链RNA。
2. MMLV逆转录病毒重组载体构建完成后与辅助质粒一起转染进入包装细胞。在包装细胞中，位于两个长末端重复序列（LTRs）之间的DNA片段会被转录成RNA，由辅助质粒表达的病毒蛋白将其包装形成病毒颗粒。包装后的活体病毒将会被释放到上清液中，可直接收集或者进行进一步纯化。
3. 当病毒转导靶细胞时，释放到宿主细胞中的病毒RNA借助逆转录酶逆转录成DNA，然后随机整合进宿主细胞的基因组中。在病毒载体中，位于两个LTR的DNA片段和病毒基因组都会稳定整合到靶细胞的基因组中。
4. 通过改造优化，我们的MMLV逆转录病毒载体删除了与病毒包装和转导相关的基因（这些基因由辅助质粒进行表达，用于病毒包装过程）。因此，通过逆转录病毒载体包装产生的病毒是复制缺陷型的（只能转导靶细胞而不能自我复制），具有非常高的生物安全性。
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