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木鼠布鲁氏菌PCR检测试剂盒说明书

产品信息
  • 使用方法：
    注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。
    1.木鼠布鲁氏菌PCR检测试剂盒说明书 样本处理（样本处理区）
    待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。
    2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）
    取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
    组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
    1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。
    2.加样（样本处理区）
    3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。
    需要自备的器材：点击了解更PCR检测试剂盒。
    1．木鼠布鲁氏菌PCR检测试剂盒说明书仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20
    µL、200 µL、1000 µL）。
    2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦（DEPC）水
    处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
    产品名称 木鼠布鲁氏菌PCR检测试剂盒说明书
    英文名称 Brucella neotomaePCR
    编号 CP912646

    反应五要素：
    木鼠布鲁氏菌PCR检测试剂盒说明书参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
    引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
    ①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
    ②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
    ③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGCZ好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
    ④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
    ⑤引物3'端的碱基，特别是Z末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
    ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列Z好有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
    ⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
    引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
    特点：
    1.木鼠布鲁氏菌PCR检测试剂盒说明书即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
    2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
    3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
    4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。注意事项：
    1．基础程序；
    2．扩增温度和延伸温度；
    3．反应时间；
    4．循环次数；
    5．PCR 反应液的配制；
    6．PCR技术的基本原理；
    7．PCR的反应动力学；
    8．PCR扩增产物；
    9．PCR反应体系与反应条件。
    马普林 CAS  订购|咨询 规格：100mg
    苯甲醛 CAS 100-52-7 订购|咨询 规格：0.5ml
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    芡实 CAS  订购|咨询 规格：
    D-焦谷氨酸 CAS  订购|咨询 规格：50mg
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    温馨提示：不可用于临床ZL。
    • 信息声明：本产品供应信息由仪器网为您整合，供应商为（上海莼试生物技术有限公司），内容包括 （木鼠布鲁氏菌PCR检测试剂盒说明书）的品牌、型号、技术参数、详细介绍等；如果您想了解更多关于 （木鼠布鲁氏菌PCR检测试剂盒说明书）的信息，请直接联系供应商，给供应商留言！
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