小鼠皮下脂肪细胞提取物说明书

小鼠皮下脂肪细胞提取物说明书产品简介：
小鼠皮下脂肪细胞提取物说明书【Mouse Fat: Normal Subcutaneous Fat CellsDerivatives】     
         小鼠皮下脂肪细胞提取物是从小鼠原代皮下脂肪细胞提取的，小鼠原代皮下脂肪细胞从正常小鼠脂肪组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
      总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
               cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
              蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人癌组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。
              潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
细胞图片：

细胞特性：
1)小鼠皮下脂肪细胞提取物说明书组织来源于实验动物的正常眼组织。
2)细胞鉴定：细胞角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式：上皮样，不规则细胞，贴壁培养。
运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)小鼠皮下脂肪细胞提取物说明书1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
细胞传代：
1) 小鼠皮下脂肪细胞提取物说明书吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2-1:3适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察；之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
WI38/VA13(SV-40Z转化肺成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-L1, 小鼠前脂肪细胞
CM-R076大鼠主动脉平滑肌细胞完全培养基100mL
ADCYAP1R1 Others Human 人 ADCYAP1R1 人细胞裂解液 (阳性对照)
SP2/0小鼠瘤细胞 Mouse myeloma cell line SP2/0 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IL12B Protein Human 重组人 IL12B / P40 蛋白 (His 标签)
小鼠皮肤肥大细胞完全培养基 100mL
IL-33/NFHEV  白介素33抗体规格： 0.2ml
IL-33  白介素33抗体规格： 0.2ml
IL-1 Alpha  白介素1α抗体规格： 0.1ml
IL-1 Beta/IL-1B  白介素1β抗体规格： 0.1ml
IL-2  白介素2抗体（大、小鼠）规格： 0.1ml
小鼠皮下脂肪细胞提取物说明书免疫球蛋白A检测试剂盒　规格：　48T/96T
免疫球蛋白A检测试剂盒　规格：　48T/96T
免疫球蛋白A检测试剂盒　规格：　48T/96T
免疫球蛋白A1检测试剂盒　规格：　48T/96T
免疫球蛋白A2检测试剂盒　规格：　48T/96T
免疫球蛋白D检测试剂盒　规格：　48T/96T
免疫球蛋白E检测试剂盒　规格：　48T/96T
免疫球蛋白E检测试剂盒　规格：　48T/96T
免疫球蛋白E检测试剂盒　规格：　48T/96T
免疫球蛋白E检测试剂盒　规格：　48T/96T
注意事项：
1.收到小鼠皮下脂肪细胞提取物说明书后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
5.客户在细胞培养过程中，有任何技术问题可以拨打技术售后服务电话。