大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒【Rat Eye PrimaCell：Normal Lens Epithelial Cells】说明书

大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒【Rat Eye PrimaCell：Normal Lens Epithelial Cells】说明书
晶状体位于玻璃体前侧，周围接睫状体，呈双凸透镜状。其中，哺乳动物晶状体细胞包括两种类型：晶状体纤维细胞和晶状体上皮细胞。单层上皮细胞覆盖在纤维前表面。眼睛晶状体的正常发育需要晶状体上皮细胞不断地分化，成熟。眼球液体中的生长因子将促进晶状体上皮细胞分化。表皮生长因子促进有丝分裂，成纤维细胞生长因子，胰岛素生长因子和胰岛素促进它的迁移和分化。 利用本公司试剂盒中提供的晶状体组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的晶状体组织能使得晶状体组织中上皮细胞的一些功能特性发生改变，从而将成骨细胞分离开来。本试剂盒
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒【Rat Eye PrimaCell：Normal Lens Epithelial Cells】说明书细胞种类：

大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒【Rat Eye PrimaCell：Normal Lens Epithelial Cells】说明书基本共性:
1、所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质及糖被构成的生物膜，即细胞膜。
2、所有的细胞都含有两种核酸：即DNA与RNA。
3、作为遗传信息复制与转录的载体。
4、作为蛋白质合成的机器—核糖体，毫无例外地存在于一切细胞内，核糖体，是蛋白质合成的机器，在细胞遗传信息流的传递中起重要作用。
5、所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。
6、能进行自我增殖和遗传
7、新陈代谢
8、细胞都具有运动性，包括细胞自身的运动和细胞内部的物质运动
大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒【Rat Eye PrimaCell：Normal Lens Epithelial Cells】说明书细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
Cy5.5标记的兔抗牛IgMRabbit Anti-Bovine IgM/Cy5.5 0.1ml
G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白2抗体 英文名称：GIT2 0.2ml
G蛋白β3抗体/鸟嘌呤核苷酸结合蛋白β亚基3 英文名称：G protein beta 3 0.2ml
色氨酸羟化酶(多肽)TPH 0.5mg
内质网氧化物蛋白Ero1-Lα抗体 英文名称：ERO1L 0.2ml
DNA聚合酶μ/DNA pol μ抗体 英文名称：DNA polymerase mu 0.2ml
细胞周期调控因子34 英文名称：CDC34 0.1ml
核受体0相关蛋白B家族2抗体 英文名称：NR0B2 0.2ml
CD98轻链抗体 英文名称：SLC7A5 0.1ml
胰辅脂酶抗体 英文名称：CLPS 0.2ml
蛋白质磷酸酶1G抗体（PP2Cγ） 英文名称：PPM1G 0.2ml
大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒【Rat Eye PrimaCell：Normal Lens Epithelial Cells】说明书大鼠Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA试剂盒英文名称：Rat cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA Kit规格:96T/48T人表皮生长因子(EGF)ELISA Kit，48T/96T
大鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒英文名称：Rat cholest erolester transfer protein,CETP ELISA Kit规格:96T/48T大鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA Kit，48T/96T
大鼠YZ素A(INH-A)ELISA试剂盒英文名称：Rat Inhibin,INH-A ELISA Kit规格:96T/48T大鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA Kit，48T/96T  
大鼠维生素E(VE)ELISA试剂盒英文名称：Rat Vitamin E,VE ELISA Kit规格:96T/48T牛酰酸检测(ACAC)ELISA Kit，48T/96T
大鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒英文名称：Rat Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit规格:96T/48T人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)ELISA Kit，48T/96T
裸鼠蛋白酸酶(PP)ELISA试剂盒英文名称：Nude Mouse Protein Phosphatase,PP ELISA Kit 规格:96T/48T人抗流行性出血热病毒抗体IgG (EHF)ELISA Kit，48T/96T
猪酰胆碱(ACh)ELISA试剂盒英文名称：Porcine acetylcholine,ACH ELISA Kit规格:96T/48T人胰多肽(PP)ELISA Kit，48T/96T
猪松弛肽/松弛素(RLN)ELISA试剂盒英文名称：Porcine Relaxin,RLN ELISA Kit规格:96T/48T人生长激素结合蛋白(GHBP)ELISA Kit，48T/96T
大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒英文名称：Rat Leptin,LEP ELISA Kit 规格:96T/48T人16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA Kit，48T/96T
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA试剂盒英文名称：Rat Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA Kit规格:96T/48T人谷胱甘肽硫转移酶pi基因(GSTpi)ELISA Kit，48T/96T
大鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒英文名称：Rat Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit规格:96T/48T人抗利尿激素/精氨酸加压素(ADH/VP/AVP)ELISA Kit，48T/96T
大鼠晶状体上皮细胞培养试剂盒【Rat Eye PrimaCell：Normal Lens Epithelial Cells】说明书操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。