小鼠肾小管平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Tubular PrimaCell: Normal Smooth Muscle Cells】说明书

小鼠肾小管平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Tubular PrimaCell: Normal Smooth Muscle Cells】说明书
肾小管的生理功能有三方面，物质的重吸收和排泌功能,如钠、钾、氯、钙等电解质,蛋白质、氨基酸、葡萄糖的吸收和排泌;尿液的浓缩稀释;泌氢和尿液酸化。其中，小鼠肾小管平滑肌细胞呈长梭形，无横纹，细胞核一个，呈长椭圆形或杆状。小鼠肾小管平滑肌细胞传3-5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然肾小管平滑肌组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的肾小管平滑肌组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的肾小管平滑肌组织片能使得肾小管平滑肌细胞的一些功能
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
小鼠肾小管平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Tubular PrimaCell: Normal Smooth Muscle Cells】说明书细胞种类：

小鼠肾小管平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Tubular PrimaCell: Normal Smooth Muscle Cells】说明书基本共性:
1、所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质及糖被构成的生物膜，即细胞膜。
2、所有的细胞都含有两种核酸：即DNA与RNA。
3、作为遗传信息复制与转录的载体。
4、作为蛋白质合成的机器—核糖体，毫无例外地存在于一切细胞内，核糖体，是蛋白质合成的机器，在细胞遗传信息流的传递中起重要作用。
5、所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。
6、能进行自我增殖和遗传
7、新陈代谢
8、细胞都具有运动性，包括细胞自身的运动和细胞内部的物质运动
小鼠肾小管平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Tubular PrimaCell: Normal Smooth Muscle Cells】说明书细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
胰岛素原抗体 英文名称：Proinsulin 0.1ml
维生素K依赖的蛋白C轻链抗体 英文名称：protein C light chain 0.2ml
N-钙粘附分子抗体 英文名称：N-cadherin 0.1ml
载脂蛋白A4抗体 英文名称：ApoA4 0.1ml
丝裂原活化蛋白激酶3K10抗体 英文名称：MAP3K10 0.2ml
细胞周期调节蛋白P95抗体 英文名称：p95 NBS1 0.2ml
20号染色体开放阅读框30抗体 英文名称：C20orf30  0.2ml
组蛋白基化KMT3B抗体（雄激素受体激活蛋白） 英文名称：KMT3B 0.2ml
肾病样蛋白3抗体 英文名称：KIRREL3 0.2ml
卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD8抗体 英文名称：CHCHD8 0.2ml
MD-2蛋白抗体 英文名称：MD-2 0.1ml
小鼠肾小管平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Tubular PrimaCell: Normal Smooth Muscle Cells】说明书大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒英文名称：Rat Factor-related Apoptosis,FAS ELISA Kit规格:96T/48T人低密度脂蛋白(LDL)ELISA Kit，48T/96T
大鼠巨噬细胞集落激因子(M-CSF)ELISA试剂盒英文名称：Rat Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA Kit 规格:96T/48T小鼠N-酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸
大鼠血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒英文名称：Rat angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit规格:96T/48T大鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISA Kit，48T/96T
大鼠酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒英文名称：Rat acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit规格:96T/48T人胰岛细胞抗原2抗体/蛋白酪氨酸磷酸酶抗体(IA-2A)ELISA Kit，48T/96T
大鼠促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒英文名称：Rat gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit规格:96T/48T小鼠网膜素(omentin)ELISA Kit，48T/96T
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA试剂盒英文名称：Rat tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1,TRAIL R1 ELISA Kit规格:96T/48T人包虫抗体IgG ELISA Kit，48T/96T
大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit规格:96T/48T人细胞分裂周期基因(CDC)ELISA Kit，48T/96T
猪肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒英文名称：Porcine Intestinal trefoil factor,ITF ELISA Kit规格:96T/48T人复制蛋白A(RPA-70)ELISA Kit，48T/96T
猪细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒英文名称：Porcine intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit规格:96T/48T人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA Kit，48T/96T
兔心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒英文名称：Rabbit cardiac troponin Ⅰ,cTn-ⅠELISA Kit规格:96T/48T人优球蛋白(EL)ELISA Kit，48T/96T
大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒英文名称：Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL ELISA Kit规格:96T/48T猴酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA Kit，48T/96T
小鼠肾小管平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Tubular PrimaCell: Normal Smooth Muscle Cells】说明书操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。