小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒【Mouse Kidney PrimaCell: Normal Endothelial Cells】说明书

小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒【Mouse Kidney PrimaCell: Normal Endothelial Cells】说明书细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒【Mouse Kidney PrimaCell: Normal Endothelial Cells】说明书
肾小球（glomerulus）为血液过滤器，肾小球毛细血管壁构成过滤膜。其中，小鼠肾小球内皮细胞分离自小鼠肾组织，肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞，能够调节肾小球过滤。它是组成过滤屏障内壁的重要部分，与肾小球的病理生理过程有关。小鼠肾小球内皮细胞传5代以上仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然肾小球内皮组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的肾小球内皮组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的肾小球内皮组织片能使得肾小球内皮细胞一些功
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒【Mouse Kidney PrimaCell: Normal Endothelial Cells】说明书细胞种类：

小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒【Mouse Kidney PrimaCell: Normal Endothelial Cells】说明书基本共性:
1、所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质及糖被构成的生物膜，即细胞膜。
2、所有的细胞都含有两种核酸：即DNA与RNA。
3、作为遗传信息复制与转录的载体。
4、作为蛋白质合成的机器—核糖体，毫无例外地存在于一切细胞内，核糖体，是蛋白质合成的机器，在细胞遗传信息流的传递中起重要作用。
5、所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。
6、能进行自我增殖和遗传
7、新陈代谢
8、细胞都具有运动性，包括细胞自身的运动和细胞内部的物质运动
小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒【Mouse Kidney PrimaCell: Normal Endothelial Cells】说明书操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。
RhoB蛋白抗体 英文名称：Rho B 0.2ml
二肽基肽酶6抗体 英文名称：DPP6 0.2ml
周期素D相互作用蛋白1抗体 英文名称：DMTF1 0.2ml
磷酸化结节性硬化蛋白抗体 英文名称：Phospho-TSC2(Ser1420) 0.1ml
胰凝乳蛋白酶B抗体 英文名称：CTRB1 0.2ml
钙结合蛋白Calponin抗体 英文名称：Calponin 1 + 2 + 3 0.2ml
内脏移位线管蛋白CFC1蛋白抗体 英文名称：CFC1 0.1ml
淀粉样肽前体蛋白抗体 英文名称：Amyloid Precursor Protein 0.1ml
11号染色体开放阅读框21抗体 英文名称：C11orf21 0.2ml
15号染色体开放阅读框41抗体 英文名称：C15orf41 0.2ml
CD20抗体 英文名称：CD20 0.1ml
小鼠肾小球内皮细胞培养试剂盒【Mouse Kidney PrimaCell: Normal Endothelial Cells】说明书人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA 英文名称：Human trypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit规格:96T/48T大鼠的牛血清白蛋白残留检测ELISA Kit，48T/96T 进口/分装
人羰基化蛋白(PC)ELISA试剂盒英文名称：Human Protein Carbonyl，PC ELISA Kit 规格:96T/48T人种胎儿球蛋白/胎蛋白(AFP)ELISA Kit，48T/96T 进口/国产
猪血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒英文名称：Porcine Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit规格:96T/48T人胸腺五肽(TP-5)ELISA Kit，48T/96T
人桥粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA试剂盒 英文名称：Human desmogleins 1,DGS-E1 ELISA Kit规格:96T/48T小鼠肾上腺髓质素(ADM)ELISA Kit，48T/96T 进口/分装
人抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhCGAb)ELISA试剂盒 英文名称：Human anti-chorionic gonadotropin-antibody,AhCGAb ELISA Kit规格:96T/48T猴抗肝细胞膜抗体(LMA)ELISA Kit，48T/96T 进口/国产
人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)ELISA试剂盒英文名称：human S100 calcium binding protein A8/calgranulin A,S100A8 ELISA Kit规格:96T/48T大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA Kit，48T/96T 进口/分装
人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒英文名称：Human peroxisome proliferators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA Kit规格:96T/48T大鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA Kit，48T/96T 进口/国产
人环加氧酶2(COX-2)ELISA试剂盒英文名称：Human cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA Kit 规格:96T/48T人凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA Kit，48T/96T 进口/分装
人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒英文名称：Human Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit规格:96T/48T大鼠血管紧张素原(aGT)ELISA Kit，48T/96T 进口/国产
人葡萄糖6磷酸异构酶(GPI)ELISA试剂盒 英文名称：Human glucose-6-phosphate isomerase,GPI ELISA Kit规格:96T/48T大鼠活化蛋白C(APC)ELISA Kit，48T/96T 进口/国产
人白喉抗体(Diphtheria Ab)ELISA试剂盒英文名称：Human Diphtheria antibody ELISA Kit规格:96T/48T人解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA Kit，48T/96T 进口/分装