小鼠小肠平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Intestine PrimacellTM：Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】说明书

小鼠小肠平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Intestine PrimacellTM：Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】说明书细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
小鼠小肠平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Intestine PrimacellTM：Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】说明书
平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式。肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生，这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。利用肠平滑肌细胞的培养，可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。 虽然小肠组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的小肠组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的小肠组织片能使得小肠组织中成小肠细胞的一些功能特性发生改变，从而将成小肠细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的成小肠细胞。本体系提
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
小鼠小肠平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Intestine PrimacellTM：Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】说明书细胞种类：

小鼠小肠平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Intestine PrimacellTM：Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】说明书基本共性:
1、所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质及糖被构成的生物膜，即细胞膜。
2、所有的细胞都含有两种核酸：即DNA与RNA。
3、作为遗传信息复制与转录的载体。
4、作为蛋白质合成的机器—核糖体，毫无例外地存在于一切细胞内，核糖体，是蛋白质合成的机器，在细胞遗传信息流的传递中起重要作用。
5、所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。
6、能进行自我增殖和遗传
7、新陈代谢
8、细胞都具有运动性，包括细胞自身的运动和细胞内部的物质运动
小鼠小肠平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Intestine PrimacellTM：Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】说明书操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。
磷酸化EGF应答因子1抗体 英文名称：phospho-ZFP36L1 (Ser92) 0.1ml
磷酸化B-Raf抗体 英文名称：phospho-B-Raf (Thr401) 0.1ml
荧光素标记豚鼠IgMGuinea IgM/FITC 0.3ml
钙激活氯离子通道4抗体 英文名称：CLCA4 0.1ml
细胞色素cP450 CYP20A1抗体 英文名称：CYP20A1 0.2ml
磷酸化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体 英文名称：phospho-alpha B Crystallin (Ser59) 0.1ml
蛋白精氨酸N基4抗体 英文名称：CARM1 0.1ml
1号染色体开放阅读框38抗体 英文名称：C1orf38 0.2ml
细胞角蛋白16抗体 英文名称：CK16 0.1ml
β淀粉样肽31-35（多肽蛋白）Beta-Amyloid (31-35) 0.1mg
卷曲螺旋结构域蛋白114抗体 英文名称：CCDC114 0.2ml
小鼠小肠平滑肌细胞培养试剂盒【Mouse Intestine PrimacellTM：Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】说明书小鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA试剂盒 英文名称：Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA Kit 规格:96T/48T大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA Kit，48T/96T
小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA试剂盒 英文名称：Mouse β-glucuronidase,βGD ELISA Kit规格:96T/48T大鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA Kit，48T/96T
小鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒英文名称：Mouse N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA Kit规格:96T/48T大鼠促状腺素(TSH)ELISA Kit，48T/96T
小鼠YZ素B(INH-B)ELISA试剂盒英文名称：Mouse inhibin B,INH-B ELISA Kit规格:96T/48T人抗型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)ELISA Kit，48T/96T
大鼠钙调磷酸酶(CaN)ELISA试剂盒 英文名称：Rat calcineurin,CaN ELISA Kit 规格:96T/48T兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA Kit，48T/96T
大鼠牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒英文名称：Rat Calf Intestine Alkaline Phosphatase,CIAP ELISA Kit规格:96T/48T人胃动素(MTL)ELISA Kit，48T/96T
大鼠甘露糖结合蛋白/甘露糖结合凝集素(MBP/MBL)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL ELISA Kit规格:96T/48T兔子血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA Kit，48T/96T
小鼠睾酮(T)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Testoterone,T ELISA Kit规格:96T/48T人睾酮(T)ELISA Kit，48T/96T
小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒英文名称：Mouse Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit规格:96T/48T人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体(AGA)ELISA Kit，48T/96T
大鼠白介素21(IL-21)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Interleukin 21,IL-21 ELISA Kit规格:96T/48T大鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA Kit，48T/96T
大鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA试剂盒英文名称：Rat Pentosidine ELISA Kit规格:96T/48T大鼠状腺过氧化物酶(TPO)ELISA Kit，48T/96T