人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】说明书

人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】说明书操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。
人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】说明书
人肾系膜细胞属于血管周细胞，位于肾小球毛细血管袢之间。其中，系膜细胞有多种生理功能包括和分泌系膜基质，胞吞和加工血浆大分子，通过系膜细胞收缩和分泌血管活性激素控制肾小球血流动力学。肾系膜细胞增生和基质的过多产生是多种肾小球肾炎的主要病理表现，如IgA肾病，狼疮性肾炎，糖尿病肾病以及在肾小球硬化过程中细胞外基质增加。在培养中细胞增殖和基质合成/降解是通过细胞因子和生长因子调控的，因此细胞培养是研究系膜扩张、瘢痕形成和肾小球硬化的理想方法。 虽然肾系膜组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的肾系膜组织分离
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。        蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。        潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。
人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】说明书细胞种类：

人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】说明书基本共性:
1、所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质及糖被构成的生物膜，即细胞膜。
2、所有的细胞都含有两种核酸：即DNA与RNA。
3、作为遗传信息复制与转录的载体。
4、作为蛋白质合成的机器—核糖体，毫无例外地存在于一切细胞内，核糖体，是蛋白质合成的机器，在细胞遗传信息流的传递中起重要作用。
5、所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。
6、能进行自我增殖和遗传
7、新陈代谢
8、细胞都具有运动性，包括细胞自身的运动和细胞内部的物质运动
人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】说明书细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
层粘连蛋白5(laminin γ2)抗体 英文名称：Laminin 5 0.1ml
组蛋白去基转移酶JMJD7抗体 英文名称：JMJD7 0.2ml
内脏器官发育转位相关蛋白NPH2抗体 英文名称：Inversin 0.2ml
大鼠白血病YZ因子LIF ELISA Kit 96T
凋亡YZ蛋白抗体 英文名称：Livin 0.1ml
黄体激素释放激素类似物抗体 英文名称：GNRH 0.1ml
酰化组蛋白H2B抗体 英文名称：Acetyl-Histone H2B(K5) 0.1ml
磷酸化黑色素瘤细胞粘附分子CD146抗体 英文名称：phospho-MCAM(Tyr641) 0.1ml
神经突触粘附样分子4抗体 英文名称：LRFN3 0.2ml
磷酸化分化相关基因NDRG1抗体 英文名称：Phospho-NDRG1 (Thr346) 0.1ml
胞浆苹果酸酶1抗体 英文名称：ME1 0.2ml
人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】说明书人诱导型一氧合成酶(iNOS)ELISA试剂盒英文名称：Human inducible nitric oxide synthase，iNOS ELISA Kit 规格:96T/48T人P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA Kit，48T/96T 特价促销
人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒英文名称：Human apoprotein A1，apo-A1 ELISA Kit规格:96T/48T鸡血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA Kit，48T/96T 进口/原装
人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒英文名称：Human Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA Kit 规格:96T/48T猪透明质酸(HA)ELISA Kit，48T/96T 特价促销
人抗DNA酶B抗体(anti-DNase B)ELISA试剂盒 英文名称：Human anti-deoxyribonuclease B,anti-DNase B ELISA Kit 规格:96T/48T人凝胶原蛋白(gelson)ELISA Kit，48T/96T 进口/原装
人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA试剂盒英文名称：Human interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA Kit规格:96T/48T人α羟基酸脱氢酶(αHBDH)ELISA Kit，48T/96T 特价促销
人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒英文名称：Human matrix metalloproteinase 11，MMP11 ELISA Kit 规格:96T/48T大鼠神经营养因子3(NT-3)ELISA Kit，48T/96T 进口/原装
人C4结合蛋白(C4BP)ELISA试剂盒英文名称：Human C4 binding protein，C4BP ELISA Kit 规格:96T/48T小鼠血小板生成素(TPO)ELISA Kit，48T/96T 特价促销
人红细胞激因子(ESF)ELISA试剂盒 英文名称：Human erythropoiesis stimulating factor,ESF ELISA Kit规格:96T/48T猴血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA Kit，48T/96T 进口/原装
人硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒英文名称：Human Thioredoxin,Trx ELISA Kit规格:96T/48T兔转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA Kit，48T/96T 特价促销
人抗中性粒细胞抗体(ANA)ELISA试剂盒 英文名称：Human anti-neutrophil antibody,ANA ELISA Kit规格:96T/48T人晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA Kit，48T/96T 进口/原装
人β2糖蛋白1抗体IgM(β2-GP1 Ab IgM)ELISA试剂盒英文名称：Human β2-Glycoprotein 1 Antibody IgM,β2-GP1 Ab IgM ELISA Kit规格:96T/48T小鼠叶酸(FA)ELISA Kit，48T/96T 特价促销