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人主动脉平滑肌细胞培养试剂盒 【Human Aortic PrimacellTM:Normal Aortic Smooth Muscle Cells】规格

产品信息
  • 人主动脉平滑肌细胞培养试剂盒 Human Aortic PrimacellTM:Normal Aortic Smooth Muscle Cells】规格操作方法:
    1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手拨打EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
    2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
    3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。
    4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。
    (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)
    5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。
    人主动脉平滑肌细胞培养试剂盒 Human Aortic PrimacellTM:Normal Aortic Smooth Muscle Cells】规格
    人主动脉平滑肌细胞分离自正常人主动脉平滑肌,呈单层扁平分布。平滑肌即无纹肌的通称。被视为较横纹肌原始的一种肌肉。其中,平滑肌细胞是多数重要动脉疾病的靶细胞。血管平滑肌的生长潜力是原发血管病发中至关重要的异常因素。 虽然主动脉平滑肌组织机械韧性很强,但利用本公司试剂盒中提供的主动脉平滑肌组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的薄的主动脉平滑肌组织片能使得主动脉平滑肌组织中主动脉平滑肌细胞的一些功能特性发生改变,从而将主动脉平滑肌细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的主动脉平滑肌细胞。本体

    RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。        cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证产品的质量。        蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。        潜在的应用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA选择性剪接;<3>基因克隆与目标测序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白检测与蛋白质组学;<6>芯片研究与表达图谱。
    立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。
    人主动脉平滑肌细胞培养试剂盒 Human Aortic PrimacellTM:Normal Aortic Smooth Muscle Cells】规格细胞种类:


    人主动脉平滑肌细胞培养试剂盒 Human Aortic PrimacellTM:Normal Aortic Smooth Muscle Cells】规格基本共性:
    1、所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质及糖被构成的生物膜,即细胞膜。
    2、所有的细胞都含有两种核酸:即DNA与RNA。
    3、作为遗传信息复制与转录的载体。
    4、作为蛋白质合成的机器—核糖体,毫无例外地存在于一切细胞内,核糖体,是蛋白质合成的机器,在细胞遗传信息流的传递中起重要作用。
    5、所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。
    6、能进行自我增殖和遗传
    7、新陈代谢
    8、细胞都具有运动性,包括细胞自身的运动和细胞内部的物质运动
    人主动脉平滑肌细胞培养试剂盒 Human Aortic PrimacellTM:Normal Aortic Smooth Muscle Cells】规格细胞培养的优点:
    1.研究的对象是活细胞
    在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
    2.研究条件可以人为控制
    pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
    3.研究的样本可以达到比较均一性
    通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
    4.研究内容便于观察、检测和记录
    采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
    RAS癌基因相关蛋白RAB17抗体 英文名称:Rab17 0.2ml

    分泌细胞凋亡相关蛋白1抗体 英文名称:SARP1 0.2ml
    丝氨酸/苏氨酸特定蛋酸酶抗体 英文名称:VHR 0.2ml
    ATP结合转运因子1抗体 英文名称:Tap1 0.2ml
    胸腺肽α1抗体 英文名称:Thymosin Alpha-1 0.1ml
    信号转导和转录激活因子4抗体 英文名称:STAT4 0.1ml
    双链RNA结合蛋白Staufen2抗体 英文名称:STAU2 0.2ml
    突触结合蛋白4抗体 英文名称:Synaptotagmin-4 0.1ml
    丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶TNN13K抗体 英文名称:TNNI3K 0.2ml
    四环素抗体 英文名称:Tetracycline 0.2ml
    基尔曼氏细小病毒VP1/VP2抗体(大鼠潜在病毒KRV)C端 英文名称:KRV-VP1+KRV-VP2 (C-terminus) 1ml
    人主动脉平滑肌细胞培养试剂盒 Human Aortic PrimacellTM:Normal Aortic Smooth Muscle Cells】规格兔骨桥素(OPN)ELISA试剂盒英文名称:Rabbit Osteopontin,OPN ELISA Kit 规格:96T/48T人碱性磷酸酶(ALP)ELISA Kit,48T/96T
    大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒英文名称:Rat Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit规格:96T/48T猪磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA Kit,48T/96T
    小鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒英文名称:Mouse Big Endothelin,Big ET ELISA Kit规格:96T/48T小鼠皮质醇(Cortisol)ELISA Kit,48T/96T
    NOD样受体(NLR)ELISA试剂盒英文名称:Human NOD-like receptor9,NLR ELISA Kit规格:96T/48T小鼠脱氧啶酚/脱氧啶啉(DPD)ELISA Kit,48T/96T 进口/原装
    E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒英文名称:Porcine E-Selectin ELISA Kit规格:96T/48T人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA Kit,48T/96T
    猪白介素3(IL-3)ELISA试剂盒英文名称:Porcine interleukin 3,IL-3 ELISA Kit规格:96T/48T人阿黑皮素原(POMC)ELISA Kit,48T/96T
    小鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒英文名称:Mouse angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit规格:96T/48T人金葡菌肠毒素(SE)ELISA Kit,48T/96T 进口/分装
    大鼠白介素3(IL-3)ELISA试剂盒英文名称:Rat Interleukin 3,IL-3 ELISA Kit 规格:96T/48T人糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA Kit,48T/96T
    大鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒英文名称:rat Resistin ELISA Kit规格:96T/48T人c-myc ELISA Kit,48T/96T
    豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒英文名称:Guinea pig Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit规格:96T/48T人强啡肽(Dyn)ELISA Kit,48T/96T
    小鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒英文名称:Mouse free fatty acids,FFA ELISA Kit规格:96T/48T大鼠热休克因子1(HSF1)ELISA Kit,48T/96T

     
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