大鼠结肠平滑肌细胞提取物

公司生产的大鼠结肠平滑肌细胞提取物质量佳，发货速度快，售后有保证。可支持各大院校先发货
细胞描述
大鼠结肠平滑肌细胞提取物大鼠结肠平滑肌细胞提取物是从大鼠结肠平滑肌细胞提取的，大鼠结肠平滑肌细胞从正常大鼠结肠组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5% PMSF，-80度保存。
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
细胞传代： 
大鼠结肠平滑肌细胞提取物1. 显微镜下观察细胞，神经干细胞悬浮成“神经球”生长，通常情况下，每两天换液一次，每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟，收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在超净工作台中轻轻吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是缩小神经球的体积，不要消化能单个神经干细胞，那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基，吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏： 
1. 大鼠结肠平滑肌细胞提取物 取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心（1000rpm，5 min）。
4. 弃去上清，再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基，转入培养瓶中培养。
细胞冻存：液氮冻存（冻存液：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO）。
细胞运输：干冰运输（冻存管）/ 常温运输（T-25培养瓶）
细胞鉴定：神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态，放大倍数为200x，右图为nestin染色后的荧光图片（绿色），放大倍数为200x。
大鼠结肠平滑肌细胞提取物相关产品：
L-乳酸镁Magnesium L-lactate hydrate型号18917-93-6作用；生化研究
L-乳酸钾Potassium L-lactate多少钱85895-78-9作用；生化研究
柠檬酸锌Zinc citrate品Pai546-46-3作用；生化研究
葡萄糖酸亚铁Iron(II) D-gluconate dihydrate规格22830-45-1作用；生化研究
葡萄糖酸镁Magnesium gluconate型号3632-91-5作用；生化研究
己二酸二丁酯/己二酸二正丁酯/己二酸丁酯/肥酸丁酯/肥酸二正丁酯/Dibutyl Adipate;CP，99%;500毫升，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai;105-99-7;RT
癸二酸二丁酯/皮脂酸二丁酯/癸二酸二正丁酯/DBS;CP，98%;100毫升，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai;109-43-3;RT
己二酸二乙酯/肥酸乙酯/己二酸乙酯/肥酸二乙酯/Diethyl adipate;CP，99%;500毫升，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai;141-28-6;RT
癸二酸二（2-乙基己基）酯/癸二酸二异辛酯/皮脂酸二异辛酯/癸二酸二辛酯/癸二酸二（2－乙基己）酯/癸二酸二-2-乙基己酯/皮脂酸二(2-乙基己基)酯/DEHS/DOS;CP，99%;500毫升，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai;122-62-3;RT
癸二酸二乙酯/皮脂酸乙酯/葵二酸二乙酯/癸二酸乙酯/皮脂酸二乙酯/1,8-辛二羧酸二乙酯/二乙基/Diethyl sebacate;CP，98%;500毫升，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai;110-40-7;RT
DL-高半胱氨酸DL-Homocysteine454-29-5含量：≥98.0%
Nα-FMOC-Nω-PBF-L-精氨酸Fmoc-Arg(Pbf)-OH154445-77-9含量：≥98.0%
FMOC-L-谷氨酸5-叔丁酯Fmoc-Glu(OtBu)-OH71989-18-9含量：≥98.0%
FMOC-S-叔丁基-L-半胱氨酸Fmoc-Cys(tBu)-OH67436-13-9含量：≥98.0%
甘氨酸叔丁酯盐酸盐Glycine tert butyl ester hydrochloride27532
THPO Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 标签)
MPC-83 腺泡细胞癌
CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人细胞裂解液 (阳性对照)
IMR-32人神经母细胞瘤细胞 IMR-32 human neuroblastoma cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS
人脑瘤细胞;SF126
人上皮细胞;MCF-10A 人前列腺平滑肌细胞完全培养基 100mL
CL-0257BC-009(人癌细胞)5×106cells/瓶×2
RP2 Others Human 人 XRP2 / RP2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人前列腺成纤维细胞cDNAHPrF cDNA
C6细胞，脑胶质瘤细胞 人肺巨细胞癌细胞,HLAmP细胞 肺大动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
犬肾细胞;MDCK(NBL-2)
EM1 Others Human 人 EM1 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠结肠平滑肌细胞提取物THPO Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 标签)
MPC-83 腺泡细胞癌
CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人细胞裂解液 (阳性对照)
IMR-32人神经母细胞瘤细胞 IMR-32 human neuroblastoma cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS
人脑瘤细胞;SF126
人上皮细胞;MCF-10A 人前列腺平滑肌细胞完全培养基 100mL
大鼠结肠平滑肌细胞提取物悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮，因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换；而是每 2 到 3 天加料一次，直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞，然后继续培养扩增，或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞，将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短。