小鼠肺大静脉内皮细胞提取物

公司生产的小鼠肺大静脉内皮细胞提取物质量佳，发货速度快，售后有保证。可支持各大院校先发货
细胞描述
小鼠肺大静脉内皮细胞提取物小鼠肺大静脉内皮细胞提取物是从小鼠肺大静脉内皮细胞提取的，小鼠肺大静脉内皮细胞从正常小鼠肺大静脉组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 μl cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人血管组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5% PMSF，-80度保存。
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
细胞传代： 
小鼠肺大静脉内皮细胞提取物1. 显微镜下观察细胞，神经干细胞悬浮成“神经球”生长，通常情况下，每两天换液一次，每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟，收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在超净工作台中轻轻吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是缩小神经球的体积，不要消化能单个神经干细胞，那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基，吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏： 
1. 小鼠肺大静脉内皮细胞提取物 取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心（1000rpm，5 min）。
4. 弃去上清，再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基，转入培养瓶中培养。
细胞冻存：液氮冻存（冻存液：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO）。
细胞运输：干冰运输（冻存管）/ 常温运输（T-25培养瓶）
细胞鉴定：神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态，放大倍数为200x，右图为nestin染色后的荧光图片（绿色），放大倍数为200x。
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固红TR/固红-萘磺酸TR/快红/固红/快红TR/4-氯-2-甲基重氮苯 1,5-萘二磺酸盐/耐晒红TR盐/固红TR重氮盐/Fast red TR;高纯;1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai;51503-28-7;保存：-20℃
固红片剂/固红-萘磺酸TR片剂/快红片剂/快红TR片剂/Fast red TR Tablets;高纯，5/100mg;5片，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai;51503-28-7;2～8℃
固红RC/固红RC盐/耐晒红RC盐/Fast red RC salt;色固;25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai;68025-25-2;RT，避光
固红GG盐/坚牢红盐/对重氮氟盐/对四氟重氮盐/4-硝基重氮苯四氟盐/Fast red GG salt;色固;10克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai;456-27-9;2～8℃，避光
碱性品红/品红/盐基品红/碱性紫14/玫/深红色/红色染料/碱性新品红/玫瑰盐酸盐//4-胺-3-雙(4-胺苯)/Fuchsin basic;IND;25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品Pai;632-99-5;RT
2′-脱氧胞苷2′-dC951-77-9含量：≥98.0%
2′-脱氧胞苷盐酸2′-dC•HC13992-42-5含量：≥98.0%
2′-脱氧鸟苷2′-dG961-07-9含量：≥98.0%
2′-脱氧肌苷2′-dI890-38-0含量：≥98.0%
2′-脱氧胸苷2-dT50-89-5含量：≥98.0%
TNF Protein Rat 重组大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白
HCC-9204 肝癌
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)
293 [HEK-293]人胚肾细胞 293 human embryonic kidney cell line [HEK-293] DMEM+10% FBS
人胚胎心脏成纤维样细胞;HEH2
人脐静脉内皮细胞(HVVEC)( 5×105 ) SK-MEL-1, 人皮肤黑色素瘤细胞 Human
CL-0405NCI-H716(人结直肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2
EPHA3 Others Mouse 小鼠 EphA3 人细胞裂解液 (阳性对照)
人脐静脉平滑肌细胞总RNAHUVSMC NA
家兔间充质干细胞;2012083MSC 人主动脉血管平滑肌细胞，T/G HA-VSMC细胞 MPC-11细胞，小鼠浆细胞瘤
人胚肺成纤维细胞;MRC-5
HA Others H4N6 甲型流感 H4N6 (A/Swine/Oario/01911-1/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠肺大静脉内皮细胞提取物TNF Protein Rat 重组大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白
HCC-9204 肝癌
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)
293 [HEK-293]人胚肾细胞 293 human embryonic kidney cell line [HEK-293] DMEM+10% FBS
人胚胎心脏成纤维样细胞;HEH2
人脐静脉内皮细胞(HVVEC)( 5×105 ) SK-MEL-1, 人皮肤黑色素瘤细胞 Human
小鼠肺大静脉内皮细胞提取物悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮，因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换；而是每 2 到 3 天加料一次，直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞，然后继续培养扩增，或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞，将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短。