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HDLEC人淋巴管内皮细胞系 实验室细胞库复苏

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  • HDLEC人淋巴管内皮细胞系 实验室细胞库复苏
    hRPTC细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    小鼠连接蛋白37(CX37)ELISA Kit,英文名:Mouse CX37 ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
    HKC细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    PIG3细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    Ca Ski细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
    Ava-82细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
    SBC-5细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:每周换液2-3次。
    PIG3细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    SPCA-1细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    大鼠碱性成纤维细胞生长因子6(BFGF 6)ELISA Kit,英文名:BFGF 6 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人整合素α4(ITGα4)ELISA Kit,英文名:Human ITGα4 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠吻素受体(KISS1R)ELISA Kit,英文名:Mouse KISS1R ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠锌结合α2-糖蛋白1(AZGP1)ELISA Kit,英文名:Mouse AZGP1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    YD-38细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
    A20[A-20]细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    冷冻细胞解冻程序:依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例,制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类,若因实验需要,必须有所不同时,务必以缓慢比例渐次改变培养基组成,确定细胞适应后,方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于37°C水槽中回温,回温后喷以70%酒精并擦拭之,移入无菌操作台内。取出冷冻管,立即放入37°C水槽中快速解冻,水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿,否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后,以70%ethanol擦拭冷冻管外部,移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度,于无菌操作台内取10ml培养基加至T25或T75flask中。取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25或T75flask内之培养基,混合均匀,放入37°C,5%CO2培养箱培养。对绝大多数细胞而言,1%以下之冷冻保护剂DMSO,不会对细胞之贴附或活化有不良影响,不需立刻由解冻细胞中去除,待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞,需立即去除DMSO者,则可将解冻后之细胞悬浮液放入5-10ml培养基中,离心300xg(约1000rpm),5分钟,小心移去上清液,加入适量新鲜培养基,将细胞均匀混合后,转移至培养瓶中,再放入37°C,5%CO2培养箱培养。
    ‭Hca-F细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    AGS细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
    NCI-H1417[H1417]细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    NF639细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    AMC-HN-8细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
    NCI-H1299细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;多角形;细胞传代方法:1:2传代;3天传代一次。
    人无翅型MMTV整合位点家族成员11(WNT11)ELISA Kit,英文名:Human WNT11 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人动力蛋白胞浆1重链1(DYNC1H1)ELISA Kit,英文名:Human DYNC1H1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠伴侣蛋白10(CPN10)ELISA Kit,英文名:Mouse CPN10 ELISA Kit,规格:48T/96T
    SW 1088[SW-1088,SW1088]细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    MC-38细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
    细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
    人无翅型MMTV整合位点家族成员7B(WNT7B)ELISA Kit,英文名:Human WNT7B ELISA Kit,规格:48T/96T
    人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA Kit,英文名:Human NHE3 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人大肠癌专一抗原2(CCSA-2)ELISA Kit,英文名:Human CCSA-2 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠抗磷壁酸抗体(TA)ELISA Kit,英文名:Mouse TA ELISA Kit,规格:48T/96T
    SNU-1细胞ZX库;细胞生长特性:悬浮聚集;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:2-3天换液1次。
    细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
    NCI-N87[N87]细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HeyA8细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    人金属蛋白1E(MT1E)ELISA Kit,英文名:Human MT1E ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠可溶性CD163分子(sCD163)ELISA Kit,英文名:sCD163 ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞背景资料:详见相关文献介绍
    小鼠成纤维细胞生长因子9(FGF9)ELISA Kit,英文名:Mouse FGF9 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠溶血卵磷脂酰基转移酶3(LPCAT3)ELISA Kit,英文名:Mouse LPCAT3 ELISA Kit,规格:48T/96T
    HSC/mHSC细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    RTE细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    常见细胞培养中一些问题总结:1)培养基中血清的比例多少合适?血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%,不要低于5%或高过20%,因为含量过低会导致细胞营养不足,过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%,可以适量加减;2)何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本数据上的更换时间,按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换;3)购买的复苏细胞,为何会有脱落?因为运输的过程中不可避免的会有震荡,收到后可以离心收集;4)购买的细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可;5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久;6)收到的冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因?冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
    VM-CUB1细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    mousepodocyte细胞ZX库;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
    NCI-H1618[H1618]细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    细胞形态特性:详见细胞说明书
    BT-549[BT549]细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    BMSC细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    大鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA Kit,英文名:CXCL16 ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠激肽释放酶7(KLK7)ELISA Kit,英文名:Mouse KLK7 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人Tau蛋白(Tau)ELISA Kit,英文名:Human Tau ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠半胱酸蛋白酶YZ剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA Kit,英文名:Cys-C ELISA Kit,规格:48T/96T
    OCI-LY7细胞ZX库;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HCT116细胞ZX库;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
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