大鼠支气管平滑肌细胞培养试剂盒【Rat AirwayPrimacellTM：NormalBronchial Smooth Muscle Cells】

大鼠支气管平滑肌细胞培养试剂盒【Rat AirwayPrimacellTM：NormalBronchial Smooth Muscle Cells】
产品信息：
产品说明
大鼠支气管平滑肌细胞培养试剂盒【Rat AirwayPrimacellTM：NormalBronchial Smooth Muscle Cells】
大鼠支气管平滑肌细胞分离自正常大鼠支气管平滑肌，呈长纺锤形纤维状分布。该细胞在维持气道张力维持支气管形态中起重要作用，气道平滑肌特异的超微结构特点和调节机制是实现气管正常生理功能的基础。 虽然支气管组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的支气管组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的支气管组织片能使得支气管组织中成支气管细胞的一些功能特性发生改变，从而将成支气管细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的成支气管细胞。本体系提供了的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维YZ体系，可以程度地降低所培养的成支气管原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠支气管平滑肌细胞培养试剂盒适合于培养人的成支气管组织细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠支气管平滑肌细胞组织解离液（3×1ml） （2）大鼠支气管平滑肌细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM大鼠支气管平滑肌细胞成纤维YZ剂（1ml（500x）） （4）大鼠支气管平滑肌组织洗液（5x100 ml） （5）大鼠支气管平滑肌细胞生长因子（1ml 500x）及血清（5x10ml） （6）大鼠支气管平滑肌细胞基础培养基（5x100 ml） （7）大鼠支气管平滑肌组织预备液（1 x100 ml） （8）大鼠支气管平滑肌细胞培养试剂盒使用说明书
试剂及耗材  
大鼠支气管平滑肌细胞培养试剂盒【Rat AirwayPrimacellTM：NormalBronchial Smooth Muscle Cells】Transwell板：
孔径<3.0µm                           细胞共培养                   研究下室细胞B代谢物（分泌物）对上室细胞A的影响
孔径=5.0、8.0、12.0µm           细胞趋化                      计数进入下室的细胞量，研究下室营养成分或趋化因子对上室细胞的影响
孔径=8.0、12.0µm                  细胞迁移                      计数进入下室的细胞量，研究上室细胞的迁移能力
孔径=8.0、12.0µm                  细胞侵袭                      计数进入下室的细胞量，研究上室细胞的侵袭能力
主要步骤
基质胶铺板、接种细胞
培养细胞、需要加药物的按相应浓度加入
细胞计数、结果统计
实验步骤：
1、大鼠支气管平滑肌细胞培养试剂盒【Rat AirwayPrimacellTM：NormalBronchial Smooth Muscle Cells】先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。  
2、在空中加入约5×105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。
3、第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。
4、用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。  
5、放入37度5% CO2培养箱中培养。按0，6，12，24小时取出，拍照 (具体时间依实验需要而定)。
6、统计方法：使用Image J软件打开图片后，随机划取6至8条水平线，计算细胞间距离的均值。
7、数据处理：每个时间点的距离长度-0h距离=每个时间长度细胞整体迁移的距离，求出均数和标准差，时间为横轴，迁移距离为纵轴（mm）作图，并比较初始0h与实验结束时试验组与对照组的照片。
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