小鼠脑微血管内皮细胞培养试剂盒【Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells】

产品说明
小鼠脑微血管内皮细胞培养试剂盒【Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells】
脑是神经系统的主要部分，位于颅腔内。低等脊椎动物的脑较简单。人和哺乳动物的脑特别发达，可分为大脑、小脑和脑干三部分。其中，小鼠脑微血管内皮细胞的主要功能是维持血管内外的动态平衡，合成和分泌细胞因子和介质，维持凝血和纤溶的动态平衡。小鼠脑微血管内皮细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 利用本公司试剂盒中提供的脑动脉血管组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的脑动脉血管组织能使得脑微血管内皮细胞一些功能特性发生改变，从而将内皮细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养小鼠脑微血管内皮细胞。本体系提供了的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维YZ体系，可以程度地降低所培养的脑微血管内皮原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠脑微血管内皮细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的脑微血管内皮细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM小鼠脑微血管内皮细胞组织解离液（3×1ml） （2）小鼠脑微血管内皮细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM小鼠脑微血管内皮细胞成纤维YZ剂（1ml（500X）） （4）小鼠脑微血管内皮组织洗液（5 x 100 ml） （5）小鼠脑微血管内皮细胞生长因子（1ml500X）及血清（5x10ml） （6）小鼠脑微血管内皮细胞基础培养基（5 x 100ml） （7）小鼠脑微血管内皮组织预备液（1 x 100 ml） （8）小鼠脑微血管内皮细胞培养试剂盒使用说明书
小鼠脑微血管内皮细胞培养试剂盒【Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells】
产品信息：
主要步骤
基质胶铺板、接种细胞
培养细胞、需要加药物的按相应浓度加入
细胞计数、结果统计
实验步骤：
1、小鼠脑微血管内皮细胞培养试剂盒【Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells】先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。  
2、在空中加入约5×105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。
3、第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。
4、用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。  
5、放入37度5% CO2培养箱中培养。按0，6，12，24小时取出，拍照 (具体时间依实验需要而定)。
6、统计方法：使用Image J软件打开图片后，随机划取6至8条水平线，计算细胞间距离的均值。
7、数据处理：每个时间点的距离长度-0h距离=每个时间长度细胞整体迁移的距离，求出均数和标准差，时间为横轴，迁移距离为纵轴（mm）作图，并比较初始0h与实验结束时试验组与对照组的照片。
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Bouin固定液　250ml　Bouin Fixative Solution　避光
Zenker固定液　250mL　Zenker Fixative Solution　
Helly固定液　250mL　Helly Fixative Solution　室温
Carnoy固定液　250mL　Carnoy Solution　室温避光
Karnovsky固定液　250mL　Karnovsky Fixative Solution　
试剂及耗材  
小鼠脑微血管内皮细胞培养试剂盒【Mouse Brain PrimaCell:Normal Brain Microvascular Endothelial Cells】Transwell板：
孔径<3.0µm                           细胞共培养                   研究下室细胞B代谢物（分泌物）对上室细胞A的影响
孔径=5.0、8.0、12.0µm           细胞趋化                      计数进入下室的细胞量，研究下室营养成分或趋化因子对上室细胞的影响
孔径=8.0、12.0µm                  细胞迁移                      计数进入下室的细胞量，研究上室细胞的迁移能力
孔径=8.0、12.0µm                  细胞侵袭                      计数进入下室的细胞量，研究上室细胞的侵袭能力