小鼠胃粘膜上皮细胞试剂盒【Mouse Stomach PrimaCell: Normal Stomach Mucosa Epithelial Cells】

小鼠胃粘膜上皮细胞试剂盒【Mouse Stomach PrimaCell: Normal Stomach Mucosa Epithelial Cells】
产品信息：
产品说明
小鼠胃粘膜上皮细胞试剂盒【Mouse Stomach PrimaCell: Normal Stomach Mucosa Epithelial Cells】
胃黏膜gastric mucosa柔软，活体呈橘红色。胃空虚时形成许多皱襞，充盈时变平坦。幽门处的黏膜形成环形皱襞，突向腔内称幽门瓣(pyloric valve)。其中，胃粘膜上皮为单层柱状上皮，排列整齐，能分泌黏液覆盖于胃黏膜的表面，防止胃酸和胃蛋白酶对胃黏膜的损害。大鼠胃粘膜上皮细胞可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 虽然胃粘膜上皮组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的胃粘膜上皮组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的胃粘膜上皮能使得胃粘膜上皮细胞一些功能特性发生改变，从而将胃粘膜上皮细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养小鼠胃粘膜上皮细胞。本体系提供了的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维YZ体系，可以程度地降低所培养的上皮原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠胃粘膜上皮细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的胃粘膜上皮细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM小鼠胃粘膜上皮细胞组织解离液（3×1ml） （2）小鼠胃粘膜上皮组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM小鼠胃粘膜上皮细胞成纤维YZ剂（1ml（500x）） （4）小鼠胃粘膜上皮组织洗液（5x100 ml） （5）小鼠胃粘膜上皮细胞生长因子（1ml 500x）及血清（5x10ml） （6）小鼠胃粘膜上皮细胞基础培养基 （5 x100ml） （7）小鼠胃粘膜上皮组织预备液（1 x100 ml） （8）小鼠胃粘膜上皮细胞培养试剂盒使用说明书
试剂及耗材  
小鼠胃粘膜上皮细胞试剂盒【Mouse Stomach PrimaCell: Normal Stomach Mucosa Epithelial Cells】Transwell板：
孔径<3.0µm                           细胞共培养                   研究下室细胞B代谢物（分泌物）对上室细胞A的影响
孔径=5.0、8.0、12.0µm           细胞趋化                      计数进入下室的细胞量，研究下室营养成分或趋化因子对上室细胞的影响
孔径=8.0、12.0µm                  细胞迁移                      计数进入下室的细胞量，研究上室细胞的迁移能力
孔径=8.0、12.0µm                  细胞侵袭                      计数进入下室的细胞量，研究上室细胞的侵袭能力
主要步骤
基质胶铺板、接种细胞
培养细胞、需要加药物的按相应浓度加入
细胞计数、结果统计
实验步骤：
1、小鼠胃粘膜上皮细胞试剂盒【Mouse Stomach PrimaCell: Normal Stomach Mucosa Epithelial Cells】先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。  
2、在空中加入约5×105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。
3、第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。
4、用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。  
5、放入37度5% CO2培养箱中培养。按0，6，12，24小时取出，拍照 (具体时间依实验需要而定)。
6、统计方法：使用Image J软件打开图片后，随机划取6至8条水平线，计算细胞间距离的均值。
7、数据处理：每个时间点的距离长度-0h距离=每个时间长度细胞整体迁移的距离，求出均数和标准差，时间为横轴，迁移距离为纵轴（mm）作图，并比较初始0h与实验结束时试验组与对照组的照片。
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