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SO-RB50人视网膜母细胞瘤细胞系 有技术指导培养

产品信息
  • SO-RB50人视网膜母细胞瘤细胞系 有技术指导培养
    人胎盘催乳素(PL)ELISA试剂盒,英文名:Human PL ELISA Kit,规格:48T/96T
    人抗C反应蛋白抗体(Anti-CRP)ELISA试剂盒,英文名:Human Anti-CRP ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠N-乙酰β-D-基葡萄糖苷酶(NAGase)ELISA试剂盒,英文名:Mouse NAGase ELISA Kit,规格:48T/96T
    人β2微球蛋白(β2-MG)ELISA试剂盒,英文名:Human β2-MG ELISA Kit,规格:48T/96T
    大鼠5脂加氧酶(5-LO)ELISA试剂盒,英文名:5-LO ELISA Kit,规格:48T/96T
    NZYM肉汤,英文名:NZYM Broth,用途:用于大肠杆菌菌株培养,配方被推荐用于重组l噬菌体的复制
    葡萄糖蛋白胨琼脂(DT培养基,不含中和剂),英文名:DT Medium,用途:用于需氧芽孢杆菌计数
    细胞生长特性:悬浮
    RKN细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    GTL16细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    MFC琼脂,英文名:MFC Agar,用途:用于大肠菌群的滤膜法检测
    GAM半固体培养基(不含葡萄糖),英文名:Glfu Anaerobic Medium Semisolid without Dextrose,用途:用于厌氧菌的保存
    SW 780细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
    GIST882细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    PA317细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    OE21细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
    细胞背景资料:视网膜母细胞瘤;女性
    霉菌液体培养基,英文名:Mould Broth Medium,用途:不含化钠,用于霉菌的增菌
    Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基基础,英文名:Karmali’s Campylobacter Medium,用途:用于弯曲菌的选择性分离培养,每100ml添加1支Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基添加剂(含头孢哌酮、化血红素、万古霉素)
    梭菌鉴别琼脂(DCA),英文名:Differentia Clostridial Agar,用途:用于干燥食品中还原梭菌的计数
    Detroit 562细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次。
    HLEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    含铁牛奶培养基(含铁牛乳培养基),英文名:Iron Milk Medium,用途:用于产气荚膜梭菌暴烈发酵试验
    细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    NT培养基,英文名:NT Medium,用途:含激素(6-BA、NAA),不含琼脂,用于原生质体的培养
    HCMEC(BL12-H)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    Li-7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
    COLO 320DM细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    COLO 201细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮+贴壁;细胞形态特性:淋巴细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    小鼠沙眼衣原体(CT)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CT ELISA Kit,规格:48T/96T
    小鼠血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)ELISA试剂盒,英文名:Mouse ANGPTL2 ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好Z至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净ZDT里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
    小鼠肺部活化调节趋化因子(PARC)ELISA试剂盒,英文名:Mouse PARC ELISA Kit,规格:48T/96T
    细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
    大鼠基质金属蛋白酶YZ因子4(TIMP-4)ELISA试剂盒,英文名:TIMP-4 ELISA Kit,规格:48T/96T
    人二酯酶7A(PDE7A)ELISA试剂盒,英文名:Human PDE7A ELISA Kit,规格:48T/96T
    改良DG-18琼脂基础,英文名:Dichloran Glycerol Agar Base,Modified,用途:用于霉菌酵母菌的计数,每升培养基中添加220g甘油
    3%化钠胰蛋白胨大豆琼脂,英文名:3% NaCl Tryptone Soy Agar,用途:用于副溶血性弧菌纯化
    FRH-0201细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    HIMEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    阴沟肠杆菌分离琼脂(ECIA),英文名:Enterobacter Cloacae Isolation Agar,用途:用于阴沟肠杆菌的分离
    改良布氏肉汤培养基,英文名:Brucella Broth,Modified,用途:用于空肠弯曲杆菌的增菌培养
    Hs 839.T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2传代,2-3天换液1次。
    细胞形态特性:详见细胞说明书
    麦康凯肌醇阿东醇羧苄青霉素琼脂(MIAC)基础,英文名:MIAC Agar Base,用途:用于克雷伯氏菌选择性分离,每100ml添加1支羧苄青霉素
    Pfizer肠球菌选择性琼脂(PSE琼脂),英文名:Pfizer Enterococcus Selective Agar,用途:用于粪链球菌选择性分离
    OVISE细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    MYGP培养基基础,英文名:MYPG Medium Base,用途:用于酵母菌的培养,每升培养基需添加10ml吐温-80
    明胶盐缓冲液,英文名:Gelatin PBS Broth,用途:用于肉毒梭菌和肉毒毒素检样的制备
    产毒培养基,英文名:Toxin-Producing Medium,用途:用于青霉和曲霉的产毒培养
    NRK-52E细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
    HCC2218细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:每周换液2—3次
    培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
    细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
    mousepodocyte细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
    RIN-m细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
    人易位关联膜蛋白1(TRAM1)ELISA试剂盒,英文名:Human TRAM1 ELISA Kit,规格:48T/96T
    DCLS琼脂,英文名:Deoxycholate Citrate Lactose Sucrose Agar,用途:用于沙门氏、志贺氏菌选择性分离
    细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
    其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。
    Eugon LT 100肉汤基础,英文名:Eugon LT 100 Broth Base,用途:用于中细菌总数的测定,每200ml添加1支吐温80
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