B16F10小鼠黑色素瘤高转移细胞系 专业传代培养技术指导
赫氏琼脂,英文名:Hiss Agar,用途:用于鼠疫杆菌的分离培养
NCI-H2227细胞专业复苏;细胞生长特性:该细胞既有悬浮生长,又有贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。
SW626[SW626,SW-626]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H4-II-E-C3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
HIT-T15细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
改良UVM增菌液基础,英文名:UVM Modified Listeria Enrichment Broth Base,用途:用于李氏菌选择性增菌,每225ml添加啶酮酸溶液1支
豆芽汁蔗糖琼脂培养基,英文名:Soybean sprout Extract Sucrose Agar Medium,用途:用于真菌尤其是霉菌的培养
HuH-28细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
厌氧基础琼脂,英文名:Anaerobe Basal Agar,用途:用于厌氧菌尤其是拟杆菌的培养,需添加5-10%无菌脱纤维绵羊全血
LP1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MM1S细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人Vav3癌基因(VAV3)ELISA试剂盒,英文名:Human VAV3 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠白细胞分化抗原8(CD8)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CD8 ELISA Kit,规格:48T/96T
NCI-H2009[H2009]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MCA38细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
EC肉汤,英文名:EC Broth,用途:用于大肠杆菌和粪大肠菌群的测定
解脲支原体肉汤基础,英文名:Ureaplasma urealyticum Broth Base,用途:用于解脲支原体培养,需添加尿素、小牛血清及YJ剂
酵母粉琼脂,英文名:Yeast Extract Agar,用途:用于水中细菌总数的测定
人防御素β116(DEFβ116)ELISA试剂盒,英文名:Human DEFβ116 ELISA Kit,规格:48T/96T
人抗子宫内膜抗体(Anti-EMAb)ELISA试剂盒,英文名:Human Anti-EMAb ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
人脂质转运蛋白(CETP)ELISA试剂盒,英文名:Human CETP ELISA Kit,规格:48T/96T
化十六烷三甲铵琼脂培养基基础,英文名:Cetrimide Agar Base,用途:用于铜绿假单胞菌选择性分离,每100ml添加1ml甘油(甘油)
抗生素培养基C(PH8.0),英文名:Medium C(PH8.0),用途:用于抗生素检测
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
马铃薯蔗糖琼脂,英文名:Potato Sucrose Agar,用途:用于真菌的培养
细胞背景资料:详见相关文献介绍
血琼脂基础2号,英文名:Blood Agar Base No2,用途:用于细菌的培养,需添加无菌脱纤维绵羊全血
SUP-M2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Capan-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:多边形;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次。
NCI-H146[H146]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Karpas-299细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
葡萄球菌培养基110,英文名:Staphylococcus Medium 110,用途:用于通过明胶、甘露醇发酵试验对葡萄球菌的分离
马铃薯蔗糖琼脂,英文名:Potato Sucrose Agar,用途:用于真菌的培养
动力-盐培养基(B法)基础,英文名:Power-nitrate Medium,用途:用于细菌动力和盐还原试验,每100ml添加1ml甘油
C4-2B细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CT-26细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞传代方法:1:2传代
CCD-112CoN细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
TPY液体培养基,英文名:TPY Broth Medium,用途:用于双歧杆菌F6PPK测定
盐还原菌培养基B,英文名:Postgate’s Medium B for Sulfate Reducers,用途:用于脱微生物的分离与培养,每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
血琼脂基础,英文名:Blood Agar Base,用途:用于血琼脂制备,需添加无菌脱纤维绵羊全血
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞学在生命科学科中起着至关重要的作用,近年来细胞学蓬勃发展,并取得了重大的进展,细胞实验室的构建也是各个院校生物学科必备的实验室。细胞实验谨慎复杂,需要的实验设备种类繁多,下面就一些动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和YJ能力就显得尤为重要。纯水系统:细胞培养用水一般要求双蒸水,实际上普通蒸馏水经玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水是不能满足要求的,而且水中的内毒素直接参与细胞凋亡,血清中内毒素含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高,会直接导致细胞提前老化。因此建议配置正式的水纯化系统。超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。移液器和细胞培养的大量耗材:细胞实验中有大量频繁的移液操作,因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量极大。除上述仪器外,高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
小鼠肌球蛋白轻链激酶(MLCK/MYLK)ELISA试剂盒,英文名:Mouse MLCK/MYLK ELISA Kit,规格:48T/96T
厌氧基础肉汤,英文名:Anaerobe Basal Broth,用途:用于厌氧菌尤其是拟杆菌的培养
Dey/Engley中和琼脂基础,英文名:Dey/Engley Neutralizing Agar Base,用途:用于样品的制备和细菌培养,每200ml添加1支吐温80
人骨成型蛋白1(BMP-1)ELISA试剂盒,英文名:Human BMP-1 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP4)ELISA试剂盒,英文名:RBP4 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CHAc ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间Z长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
1%吐温80-玉米琼脂培养基基础,英文名:1% Tween80-Corn Meat Agar Medium Base,用途:用于白色念珠菌产芽管试验,每100ml添加1ml吐温80(吐温80)
VX-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
NB4(NB-4)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SVG p12细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H125细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。